OD600指的是某種溶液在600nm波長處的吸光值。吸光值正比於溶液中的吸光物質的濃度，相應地與樣品的透過率T值成反比，在數值上來說，它們之間是對數關係。
基本介紹
- 外文名：OD600
- 解釋：某種溶液在600nm波長處的吸光值
- OD：optical density（光密度）
- OD值：1OD=log10（1/trans）
- 波長：600nm
- 套用：細菌細胞密度(OD600)測量
簡介,行業套用,測量方法,注意事項,主要內容,
簡介
行業套用
它的一個重要套用，就是利用細菌的吸光來測量細菌培養液的濃度，從而估計細菌的生長情況，所以通常用來指菌體細胞密度。 比如，測量細菌培養液在600nm處的吸光值，得到的OD600的數值如果在0.6-0.8之間，表明細菌處於旺盛生長的對數生長期，OD600>3表明細菌已經飽和等。細菌的生長情況,可以通過測OD600來監測。細菌的生長比較好的時期是在OD600為1時,此時可以進行轉代等研究.在細菌的培養中,OD600超過0.8就要稀釋培養液。
測量方法
實驗室確定細菌生長密度和生長期，多根據經驗和目測推斷細菌的生長密度。在遇到要求較高的實驗，需要採用分光光度計準確測定細菌細胞密度。OD600是追蹤液體培養物中微生物生長的標準方法。以未加菌液的培養液作為空白液，之後定量培養後的含菌培養液。
2、OD值的名詞解釋與測量方法的實現
2.1 OD值名詞定義：OD是optical density（光密度）的縮寫，表示被檢測物吸收掉的光密度，是檢測方法裡的專有名詞，檢測單位用OD值表示，1OD=log10（1/trans），其中trans為檢測物的透光率T值。光通過被檢測物，前後的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量，特定波長下，同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關係。
2.2 測量方法的實現：知道的測量原理就是用分光光度計來實現，包括可見和紫外分光光度計都可以，因為波長是在600nm，市面上所有的分光光度計都可以滿足要求，但根據實驗者對測量數據的精度和準確度的要求可以選擇不同檔次的光度計來實現。也有部分廠家的光度計直接支持OD600，例如天美的UV1100。如果是普通的分光光度計我們也可以實現OD600的測定，
第一步在儀器的光度計模式中，先把波長走到600nm；
第二步放入我們的空白樣品，進行調零操作；
第三步放入樣品直接顯示樣品的T值（透過率值），之後帶入OD值與T值的換算公式中可以得到OD600。個人感覺以後光度計可以直接增加測定OD值的功能，簡單的辦法就是在測量模式中直接加入OD選項，只需要簡單的編程就可以。
注意事項
分光光度計要測量的樣品必須是均一的溶液，不能有沉澱，如果有沉澱的話就要搖勻。為了保證正確操作，必須針對每種微生物和每台儀器用顯微鏡進行細胞計數，做出校正曲線。實驗中偶爾會出現菌液的OD值出現負值，原因是採用了顯色的培養基，即細菌培養一段時間後，與培養基反應，發生變色反應。另外，需要注意的是，測試的樣品不能離心，保持細菌懸浮狀態。注意，一般來說樣品的吸光度值在0.1-1.5Abs之間可以保證儀器的準度和測量結果的線性關係。對於濃度過度的樣品建議稀釋後再進行測定。
分光光度計的重要配件—— 比色杯
比色杯按照材質大致分為石英杯、玻璃杯以及塑膠杯。根據不同的測量體積，有比色杯和毛細比色杯等。一般測試核酸和紫外定量蛋白，均採用石英杯或者玻璃杯，但是不適合比色法測定。因為反應中的染料（如考馬斯亮蘭）能讓石英和玻璃著色，所以必須採用一次性的塑膠杯。而塑膠杯一般不適合用於在紫外範圍內測試樣品。
由於另外測試的樣品量不同，所以一般分光光度計廠家提供不同容積的比色杯以滿足用戶不同的需求。市場已經存在一種既可用於核酸、紫外蛋白質定量，亦可用於蛋白比色法測定的塑膠杯，樣品用量僅需50μl，比色杯單個無菌包裝，可以回收樣品。如Eppendorf UVette®塑膠比色杯，比色杯市場上一個革新。隨著生命科學以及相關學科發展，對此類科學的實驗研究提出更高的要求，分光光度計將是分子生物學實驗室不可缺少的儀器，也成為微生物、食品、製藥等相關實驗室的必備設備之一。
主要內容
為什麼需要測量OD600 OD值的名詞解釋與測量方法的實現
OD600在行業中的套用
細菌細胞密度(OD600)測量時的注意事項
