《Notch信號與TGF-β1/Smad3互動作用調控心肌纖維化的機制研究》是依託南昌大學，由周學亮擔任項目負責人的地區科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：Notch信號與TGF-β1/Smad3互動作用調控心肌纖維化的機制研究
- 項目類別：地區科學基金項目
- 項目負責人：周學亮
- 依託單位：南昌大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
Notch信號通路具有良好的心肌保護效應，但在心肌纖維化領域尚未深入研究。在前期工作基礎上，我們將圍繞Notch信號通路，利用TGF-β1誘導心臟成纖維細胞-肌成纖維細胞轉化，從中篩選可能調控心肌纖維化的關鍵分子。再以此為切入點，採用轉基因技術，從細胞增殖、遷移、黏附、膠原合成等角度觀察Notch信號通路在心肌纖維化中的生物學效應；套用免疫共沉澱及雷射共聚焦顯微鏡探索Notch與TGF-β1/Smad3之間的互動作用，以闡述Notch-TGF-β1/Smad3循環反饋機制在心肌纖維化中的調控意義；利用雙螢光素酶報告基因、染色體共沉澱及凝膠遷移技術探討Notch-TGF-β1/Smad3互動作用對肌成纖維細胞標誌性基因α-SMA的表達調節，以闡明Notch調控心肌纖維化的分子機理；最後在大鼠心肌梗死模型上進一步比較論證，力求確定心肌纖維化防治新靶點，為開發新型抗心肌纖維化藥物提供理論依據。
結題摘要
我們以Vimentin、DDR2、α-SMA、Tensin表達變化確認TGF-β1誘導CMT成功，從中篩選出Notch1在心肌纖維化中可能具有關鍵調控作用；以腺病毒載體操縱Notch1在CFB內的表達，發現Notch1通過抑制CMT，減輕CFB的增殖、遷移、黏附、膠原合成能力；Notch1-TGF-β1補償實驗證明Notch1可以廢除TGF-β1誘發的心肌纖維化；Co-IP及Confocal microscopy細胞核共定位確認N1ICD與TGF-β1下游分子Smad3存在相互作用，Dual-luciferase reporter assay表明Notch-TGF-β1/Smad3互動作用抑制α-SMA轉錄表達；建立Sprague-Dawley 大鼠MI模型，從心肌病理變化、羥脯氨酸含量、左心功能角度，進一步比較論證Notch信號通路在心肌纖維化中的調控作用。我們研究表明Notch1信號通路通過對抗Notch-TGF-β1/Smad3介導的CMT，抑制心梗後心肌纖維化；已闡明Notch信號與TGF-β1/Smad3互動作用調控心肌纖維化的相關分子機制，為開發新型抗心肌纖維化藥物奠定的理論與實驗基礎。
