Northern blotting

Northern 雜交（Northern blotting）

1979年，J.C.Alwine等提出：將電泳凝膠中的RNA轉移到疊氮化的或其他化學修飾的活性濾紙上，通過共價交聯作用使它們結合，因其方法同Southern雜交十分相似，故稱之為Northern雜交。

基本介紹

• 中文名：雜交
• 外文名：Northern blotting
• 時間：1979年
• 人物：J.C.Alwine

定義

Northern雜交是利用DNA可以與RNA進行分子雜交來檢測特異性RNA的技術，首先將RNA混合物按它們的大小和分子量通過瓊脂糖凝膠電泳進行分離，分離出來的RNA轉至尼龍膜或硝酸纖維素膜上，再與放射性標記的探針雜交，通過雜交結果可以對表達量進行定性或定量。

RNA混合物進行瓊脂糖凝膠電泳→分離得到的RNA轉膜→與放射性標記的探針雜交 →結果分析

性質

Northern雜交與Southern雜交相比，條件要嚴格些，特別是RNA容易降解，前期製備和轉膜過程易受RNase污染，要獲得較好結果，需用穩定性最差的mRNA與DNA進行雜交，對實驗條件要求嚴格；然而有些套用中Northern雜交避免用複雜探針篩選cDNA文庫的繁瑣

套用

Northern雜交技術套用於特定性狀基因在mRNA水平上的動態表達研究。如套用於定位克隆中尋找新基因，尋找染色體特定區域的表達序列是大多數人類遺傳疾病連鎖分析和定位克隆的主要限速步驟，Northern雜交作為尋找這些序列的有效方法，有助於這些疾病候選基因的篩選；