NLRC4炎性體途徑的激活對減毒沙門菌免疫效力的影響分析

《NLRC4炎性體途徑的激活對減毒沙門菌免疫效力的影響分析》是依託揚州大學，由胡茂志擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：NLRC4炎性體途徑的激活對減毒沙門菌免疫效力的影響分析
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：胡茂志
• 依託單位：揚州大學

項目摘要

沙門菌是一類重要的兼性胞內致病菌，吞噬細胞是其主要的宿主細胞。沙門菌能夠逃逸吞噬細胞的殺傷，並在細胞內長期存活，這給畜禽和人類健康帶來了嚴重危害。目前，在減毒沙門菌疫苗研究中，如何抑制減毒菌的胞記憶體活仍是阻礙其套用的難點之一。據報導，細胞內模式識別受體NLRC4能夠識別細胞質中的微生物成分，誘導宿主細胞的程式性死亡，並產生Th1類免疫應答，在防禦胞內菌感染中起重要作用。因此，若將該機制套用到減毒沙門菌疫苗的設計中，則能抑制減毒菌的胞記憶體活。但是，該機制的引入對減毒菌免疫效力的影響尚不清楚。據此，本項目擬構建融合表達SspH2蛋白N端（能被沙門菌III型分泌系統2識別並分泌）和EscI蛋白C端（能激活NLRC4炎性體）的重組減毒沙門菌，分析NLRC4炎性體的激活對減毒沙門菌毒力、體記憶體活能力和免疫效力的影響，探索NLRC4炎性體通路在減毒沙門菌疫苗研製中的套用前景。

結題摘要

沙門菌是一類重要的兼性胞內致病菌，吞噬細胞是其主要的宿主細胞。沙門菌感染機體後，能夠逃避吞噬細胞的殺傷並在細胞內長期存活，這給畜禽和人類健康帶來了嚴重危害。目前，在減毒沙門菌疫苗的研究中，如何抑制減毒菌的胞記憶體活仍是阻礙其套用的難點之一。據報導，細胞內模式識別受體NLRC4能夠識別細胞質中的微生物成分，激活巨噬細胞內的炎性體途徑，有利於沙門菌的清除。因此推測，若將該機制套用到減毒沙門菌疫苗的設計中，則能抑制細菌的胞記憶體活。但該機制的引入對減毒菌免疫效力的影響尚不清楚。據此，本項目首先用EscI蛋白羧基端多肽體外刺激小鼠腹腔巨噬細胞，建立了細胞內炎性體通路的活化分析技術。然後以減毒沙門菌X4550為材料構建了融合表達沙門菌SspH2蛋白N端和EscI蛋白C端的重組減毒沙門菌。分析結果表明，與只表達SspH2蛋白N端的對照菌相比，該重組菌體外感染巨噬細胞後激活炎性體應答的能力明顯增強。將其感染小鼠後，其在小鼠體內的定殖能力、對小鼠的致病性和誘導獲得性免疫應答的能力均降低。另外，將其免疫小鼠後，能夠抑制其他菌株在小鼠體內的早期定殖，同時提高針對強致病性菌株攻擊的免疫保護效力。通過分析，不僅發現了EscI蛋白羧基端15個胺基酸是激活炎性體應答的關鍵位點。而且，首次用重組菌的模式分析了炎性體通路的活化與沙門菌免疫效力之間的關係，為炎性體通路在減毒沙門菌疫苗研製中的套用研究提供新認識和新途徑。