《Multimerin 2通過拮抗C1q/RAGE通路抑制動脈粥樣硬化發生研究》是依託上海交通大學，由王勇擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：Multimerin 2通過拮抗C1q/RAGE通路抑制動脈粥樣硬化發生研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：王勇
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
終末糖化產物受體（RAGE）通路與動脈粥樣硬化（AS）發生關係密切。我們用蛋白組學實驗發現並證實，C1q和multimerin 2均與RAGE結合，兩配體間存在競爭。冠心病患者血清C1q升高而multimerin 2降低，兩者水平與冠脈病變嚴重性相關。C1q促進小鼠AS發生；而multimerin 2抑制C1q誘導的內皮細胞炎症反應及內皮細胞-單核巨噬細胞互動作用。結合文獻提示multimerin 2可能通過包括拮抗C1q-RAGE結合及其促炎效應等環節來抑制AS發生。後續將利用免疫共沉澱、酵母雙雜交、放射性配體受體結合、晶片分析、腺病毒過表達等技術從細胞和動物整體水平驗證multimerin 2抑制AS效應，明確multimerin 2拮抗C1q/RAGE通路和干預AS發生機制，揭示C1q-RAGE-multimerin2互動作用、結合的效能和位點。從而闡明multimerin 2抑制AS的作用及機制。
結題摘要
動脈粥樣硬化是心腦血管事件發生的病理生理基礎。內皮屏障功能受損和血管內膜通透性增加是較早的表現，將有助於單核巨噬細胞跨內皮轉移，加劇動脈炎症反應的發生。Multimerin-2 (MMRN2)是一種主要表達於血管表面的細胞外基質蛋白，但是否與血管內皮屏障功能及通透性有關、與動脈粥樣硬化的發生有無關聯還不清楚。課題組主要從組織和動物整體層面研討了MMRN2與血管內皮屏障功能以及動脈粥樣硬化的關係。以血管內皮細胞和小鼠為研究對象，從體外細胞學水平研究外源性重組MMRN2蛋白對炎症因子導致的人臍靜脈內皮細胞（HUVEC）的通透性改變的作用，以及炎症因子和血管通透性相關分子表達的作用；從整體小鼠水平研究MMRN2對炎症因子導致的主要臟器血管通透性改變的影響；研究MMRN2對ApoE敲除小鼠動脈粥樣硬化的作用。實驗結果發現：LPS和TNF-α分別使HUVEC單層通透性增加，而MMRN2抑制這一效應。Western blot檢測顯示LPS和TNF-α使炎症因子（IL-6、COX-2和TNF-α）表達上調，而MMRN2劑量依賴性降低這些炎症因子的表達。Western blot顯示LPS和TNF-α使P-MLC、ROCK2、P-MYPT表達增加，而MMRN2劑量依賴性降低這些內皮通透性相關因子的表達，表明MMRN2通過影響內皮細胞MLC磷酸化從而調節血管內皮通透性。LPS腹腔注射分別使C57BL/6小鼠的內臟血管通透性增加，MMRN2可以抑制小鼠臟器血管通透性增加，然而MMRN2基因敲除可以使小鼠內臟血管通透性增加更為顯著。免疫螢光檢測和western blot檢測發現，有粥樣硬化病變的冠狀動脈較人正常內乳動脈MMRN2表達量顯著減少。重組MMRN2蛋白腹腔注射使ApoE基因敲除小鼠的主動脈動脈粥樣硬化斑塊顯著減輕，同時小鼠主動脈血管通透性減少；然而，MMRN2和ApoE基因雙敲除小鼠的主動脈動脈粥樣硬化斑塊顯著加重，同時主動脈血管通透性增加更為嚴重。通過本研究發現，MMRN2可以抑制血管內皮通透性增加，並且抑制動脈粥樣硬化的發生。本課題的完成將有助於闡明MMRN2改善動脈粥樣硬化的重要作用和機制，將可能為動脈粥樣硬化的防治提供新的靶點和治療策略。
