《MicroRNA126調控內皮祖細胞VEGF旁分泌與自分泌的信號機制研究》是依託同濟大學，由羅明擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：MicroRNA126調控內皮祖細胞VEGF旁分泌與自分泌的信號機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：羅明
- 依託單位：同濟大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
祖細胞具有旁分泌/自分泌功能，調控此功能是細胞治療的重要理論依據。糖尿病患者內皮祖細胞（EPC）生物學功能減退，機制不清，有關旁分泌/自分泌研究很少。我們前期工作發現：EPC有較強VEGF旁分泌/自分泌功能，作用於細胞膜受體KDR，形成VEGF/KDR環路，促進細胞分化和血管新生；高糖條件，VEGF減少導致細胞功能減退，原因不明。最新發現miR-126通過促進VEGF分泌而影響胚胎血管發育；我們結果也提示VEGF是miR-126的可能的靶點。miRNA通常選擇信號轉導通路上的蛋白為靶點，調控VEGF的主要有ERK-HIF1-α和PI3K-PKB兩條信號通路，miR-126對VEGF調控是直接作用，還是調控以上信號通路實現？miR-126能否成為改善EPC功能的靶點？本研究將從信號通路方面闡明miR-126對VEGF影響及機制，並從動物整體水平進行驗證，揭示其機制，為臨床提供理論依據。
結題摘要
本研究以內皮祖細胞（EPCs）血管內皮舒張因子（VEGF）自分泌的調控為重點，運用miR-126基因轉染，結合microRNA禁止技術，從microRNA、蛋白、細胞生物功能水平，探討miR-126調節內皮祖細胞自分泌的機制，探討糖代謝紊亂條件下內皮祖細胞功能受損的機制，為內皮祖細胞治療缺血性疾病提供新的理論依據。 研究結果如下： （1）轉染、禁止及補償miR-126，觀察miR-126對EPCs生物學功能（即增殖、分化、遷移、血管生成的變化） 上調miR-126能夠促進EPCs的增殖能力（MTT方法檢測）、可以增加 S 期細胞的百分比並降低 G0/G1 期細胞的百分比（流式細胞技術檢測）、遷移能力（穿膜實驗檢測）、成血管能力（Matrigel成小管實驗檢測），下調miR-126效應相反，即降低EPCs的增殖能力（MTT方法檢測）、降低S期細胞的百分比並增加G0/G1期細胞的百分比（流式細胞技術檢測），遷移能力（穿膜實驗檢測）、成血管能力（Matrigel成小管實驗檢測）（P＜0.01）。 （2）觀察轉染、禁止及補償miR-126對EPCs 的VEGF旁分泌/自分泌影響 上調miR-126能夠促進EPCs的VEGF的自分泌（Western blot方法檢測），此為通過RTK- PI3K-PKB-HIF-VEGF這一信號通路間接發揮作用的。
