《MiR-93靶向調控Angiopoietin2/Tie2軸在惡性胸腔積液形成中的作用》是依託東南大學，由錢倩擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：MiR-93靶向調控Angiopoietin2/Tie2軸在惡性胸腔積液形成中的作用
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：錢倩
- 依託單位：東南大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
惡性胸腔積液（MPE）是肺癌預後不良標誌，治療手段有限。研究顯示血管生成素2（Ang2）通過結合酪氨酸激酶型受體2（Tie2）參與淋巴管產生，在惡性胸腔積液發展過程中發揮關鍵作用。課題組前期研究發現，miR-93在MPE患者預後較好組胸腔積液中顯著高表達，資料庫預測及分子實驗證實miR-93參與調控Ang2表達。因此我們推測：miR-93可能通過調控Ang2抑制淋巴管形成，並抑制MPE產生。本項目擬通過分子和細胞水平實驗探究miR-93調控Ang2/Tie2軸在淋巴管形成過程中的功能，解析MPE發生機制，闡明miR-93在MPE形成中的調控作用；通過構建MPE動物模型，合成化學修飾miR-93激動劑和拮抗劑，觀察胸腔內局部給藥對MPE轉歸的影響，評價其潛在治療價值。期望從轉錄後水平這個新視角，拓展對MPE產生機制的認識，為抗淋巴管生成及淋巴道轉移治療提供理論基礎，探索MPE局部治療新策略。
結題摘要
惡性胸腔積液（MPE）是肺癌預後不良標誌，治療手段有限。研究顯示血管緊張素2（Ang2）通過結合酪氨酸激酶型受體2（Tie2）參與淋巴管產生，在惡性胸腔積液發展過程中發揮關鍵作用。課題組前期研究發現，miR-93在MPE患者預後較好組胸腔積液中顯著高表達，資料庫預測及分子實驗證實miR-93參與調控Ang2表達，推測miR-93可能通過調控Ang2抑制淋巴管形成，並抑制MPE產生。課題組臨床研究研究部分，採用miRNA晶片技術，篩選10例肺腺癌患者惡性胸腔積液表達譜。結合臨床預後分析可能相關的miRNA。擴大樣本量驗證實驗，通過實時定量PCR，在84例臨床標本中進行檢測，結合臨床預後分析確認表達差異的miRNA。最終利用miRNA晶片和PCR技術明確miRNA-93和miRNA-146a在預後較好的惡性胸腔積液中高表達，可能發揮抑制胸腔積液的作用。體外研究通過構建細胞miRNA轉染模型，進行Transwell細胞遷移實驗、CCK8法和平板克隆實驗檢測細胞增殖能力、細胞成管實驗、細胞周期和凋亡等細胞生物學功能。通過螢光素酶報告基因實驗預測和驗證，線上資料庫預測的靶基因和結合位點的結合能力，蛋白免疫印跡檢測靶基因蛋白水平表達變化, 證實miR-93參與調控Ang2表達。研究發現miR-93通過調控Ang2/Tie2，參與對內皮細胞的遷移、增殖、成管和細胞周期等調控作用；並通過調節新生血管和新生淋巴管，發揮抑制胸腔積液的作用。構建裸鼠惡性胸腔積液模型，通過胸腔注入miR-93激動劑能顯著抑制MPE的產生。課題發現miR-93通過調控Ang2表達，調節新生血管和新生淋巴管的產生，發揮抑制胸腔積液的作用。
