MSCs治療乾燥綜合徵中CD4+ T細胞miRNAs通路的作用機制

《MSCs治療乾燥綜合徵中CD4+ T細胞miRNAs通路的作用機制》是依託同濟大學，由湯建平擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：MSCs治療乾燥綜合徵中CD4+ T細胞miRNAs通路的作用機制
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：湯建平
• 依託單位：同濟大學

中文摘要

MSCs能抑制CD4+ T細胞增殖和炎性細胞因子分泌，臨床上已用來治療乾燥綜合徵等自身免疫病，然而其作用機制未完全清楚。近年研究報導MSCs分泌的許多可溶性因子能通過不同機制改變細胞miRNAs表達，進而影響細胞功能，而CD4+ T細胞內異常miRNAs與自體反應性T細胞功能異常相關。本研究運用MSCs分別與健康者、SjS患者活化的外周血CD4+ T細胞體外共培養，探討其對CD4+ T細胞miRNAs和靶基因表達的影響，以及可能的影響途徑，通過miRNAs過表達和抑制實驗研究miRNAs對MSCs抑制CD4+ T細胞功能的影響；運用同基因骨髓MSCs治療SjS小鼠，探討其對體內脾臟CD4+ T細胞和唾液腺組織miRNAs和靶基因表達及功能的影響。我們試圖發現MSCs是否通過調控活化CD4+ T細胞miRNAs，進而抑制CD4+ T細胞功能，達到改善SjS自體反應性T細胞異常目的。

結題摘要

間充質幹細胞（mesenchymal stem cells，MSCs）能抑制自體免疫反應中CD4+ T細胞增殖和下游炎性細胞因子分泌，本研究通過對SS患者與NOD模型小鼠的MSCs治療研究，試圖發現MSCs是否通過調控活化CD4+ T細胞miRNAs及相關炎性因子的表達，進而抑制CD4+ T細胞功能，達到改善SS自體反應性T細胞異常目的。 為探討體外MSCs對人體CD4+ T細胞的細胞因子分泌與miRNAs表達的影響，本研究首先運用hUC-MSCs分別與健康者、SS患者活化的外周血CD4+ T細胞體外共培養，發現在CD3、CD28抗體共刺激下，MSCs能抑制活化的CD4+ T細胞增殖，同時抑制CD4+ T細胞凋亡，尤其在用IFN-γ預刺激MSCs後；miRNA晶片發現MSCs能使活化的外周血CD4+ T細胞內miR-4734等表達上調，使miR-155等表達下調；MSCs共培養組和IFN-γ預刺激後MSCs共培養組上清液中PGE2等水平均有升高，提示MSCs可能通過分泌PGE2等可溶性因子改變CD4+ T細胞miRNAs表達，抑制CD4+ T細胞活化、增殖等。 對SS自發病模型NOD小鼠套用hUC-MSCs進行在體治療實驗中發現，hUC-MSCs能使小鼠脾臟CD4+ T細胞內miR-690等35個miRNAs表達下調，使miR-20a-5p等24個miRNAs表達上調；MSCs治療組小鼠血清中IL-6、HGF、IL-10、PGE2、TGF-β1等水平均有升高，而IL-2、IFN-γ等水平下降，提示MSCs可能通過促進HGF、IL-10、PGE2、TGF-β1等抑炎因子的分泌，抑制IL-2、IFN-γ等炎症因子，調控CD4+ T細胞miRNAs表達而發揮其治療作用。 為研究MSCs對SS患者CD4+ T細胞的免疫抑制效應, 本課題組用生物學活性更穩定的人乳牙牙髓幹細胞（SHED）聯合IL-6抗體或STAT3抑制劑體外作用於乾燥綜合徵患者的PBMC中CD4+ T細胞，發現SHED可抑制SS患者PBMC中CD4+ T細胞的增殖，增加SS患者CD4+ T細胞中Treg的比例；IL-6抗體可降低與SHED共培養的SS患者PBMC中CD4+ T細胞Th2亞型比例；STAT3抑制劑可降低CD4+ T細胞Th1、Th2、Th17和Treg的比例，對Tfh比例無明顯影響。