《MDM2在Ph+急性淋巴細胞白血病伊馬替尼耐藥中的作用》是依託四川大學，由郭勇擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：MDM2在Ph+急性淋巴細胞白血病伊馬替尼耐藥中的作用
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：郭勇
- 依託單位：四川大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
耐藥是伊馬替尼治療Ph+ALL的主要障礙。研究伊馬替尼耐藥機制、尋找高效的耐藥逆轉靶點是Ph+ALL研究的熱點和難點。本課題組以Ph+ALL細胞株SUP-B15通過濃度遞增法構建了伊馬替尼耐藥細胞株SUP-B15/RI，基因晶片發現SUP-B15/RI細胞中鼠雙微體（MDM2）表達較親本細胞SUP-B15顯著上調，Western Blot檢測發現SUP-B15/RI細胞P53白水平顯著下調，推測MDM2過表達而介導P53通路失活是伊馬替尼耐藥的重要原因，但具體機制尚不清楚。本項目擬從細胞株、病人原代細胞、小鼠模型等層面，採用特異抑制劑、基因過表達/沉默技術、細胞內共定位螢光染色技術、Western Blot等探討MDM2在Ph+ALL伊馬替尼耐藥中的作用，闡明MDM2-P53通路與Ph+ALL促生存通路AKT/mTOR間的相互協同及機制，為逆轉Ph+ALL伊馬替尼耐藥提供新靶點、新策略。
結題摘要
項目背景：研究伊馬替尼耐藥機制、尋找高效的耐藥逆轉靶點是 Ph+ALL 研究的熱點和難點。本課題組以 Ph+ALL 細胞株SUP-B15通過濃度遞增法構建了伊馬替尼耐藥細胞株 SUP-B15/RI，基因晶片發 現 SUP-B15/RI 細胞中鼠雙微體(MDM2)表達較親本細胞SUP-B15顯著上調，Western Blot 檢測發現SUP-B15/RI細胞P53蛋白水平顯著下調，推測 MDM2 過表達而介導P53通路失活是伊馬替尼耐藥的重要原因，但具體機制尚不清楚。 主要研究內容：從SUP-B15和SUP-B15/RI細胞株、12例 Ph+ALL 病人原代細胞（包括6例復發患者，其中3例患者伴有BCR/ABL激酶區T315I突變）、NOS/SCID小鼠 Ph+ALL 模型3個層面，採用特異抑制劑、基因過表達、Western Blot 等技術研究探討MDM2在Ph+ALL伊馬替尼耐藥中的作用,闡明MDM2-P53通路在Ph+ALL伊馬替尼耐藥中的作用。 主要研究結果及關鍵數據：（1）在SUP-B15/RI細胞株，MDM2抑制劑Nutlin-3通過活化P53通路部分逆轉伊馬替尼耐藥，但Nutlin-3不能抑制 AKT/mTOR通路的活化；採用 AKT/mTOR 信號抑制劑(BEZ235) 同時靶向AKT/mTOR通路，BEZ235通過抑制MDM2磷酸化協同Nutlin-3活化P53通路，從而提高逆轉伊馬替尼耐藥的效率；（2）在SUP-B15細胞，過表達MDM2基因，p53通路活性因此被部分抑制，SUP-B15細胞對伊馬替尼的敏感性降低；（3）在Ph+ALL 病人原代細胞， 復發患者白血病細胞MDM2的表達明顯高於初發患者，Nutlin-3同樣能部分逆轉耐藥細胞對伊馬替尼的耐藥，BEZ235與Nutlin-3能協同逆轉耐藥；（4）以SUP-B15/RI細胞株在NOS/SCID小鼠建立 Ph+ALL 模型，Nutlin-3能體內逆轉伊馬替尼耐藥。 科學意義：本課題研究證實MDM2 過表達是伊馬替尼耐藥的重要原因，阻斷MDM2、活化P53能逆轉伊馬替尼耐藥，AKT/mTOR抑制劑協同活化P53從而協同逆轉耐藥，上述研究結果拓展了伊馬替尼耐藥的機制，並為MDM2抑制劑及AKT/mTOR抑制劑用於逆轉Ph+ALL伊馬替尼耐藥提供理論依據。
