《MDA7/IL-24基因對CD133陽性肝癌腫瘤幹細胞的作用與機制》是依託吉林大學，由王楠婭擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：MDA7/IL-24基因對CD133陽性肝癌腫瘤幹細胞的作用與機制
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：王楠婭
- 依託單位：吉林大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
肝細胞癌是世界範圍內公認的嚴重致死性惡性腫瘤之一，復發、轉移、耐藥等各因素嚴重限制了療效的提高。腫瘤幹細胞理論認為，肝癌的上述特點起源於腫瘤幹細胞的存在。其中，CD133作為肝癌腫瘤幹細胞重要標誌物之一，被認為是治療難治復發肝癌的重要靶點。抑癌基因MDA7/IL-24具有誘導凋亡、抑制血管新生、增加放化療敏感性等多重抗癌效應。這些作用恰與CD133+腫瘤幹細胞的生物學特徵相拮抗，作用機制的信號傳導通路位點也有交叉。本研究通過篩選CD133+肝癌幹細胞，並建立CD133+肝細胞癌的動物模型。分析IL-24受體在CD133+肝癌幹細胞及其肝癌組織中的表達情況，並將腺相關病毒介導MDA7/IL-24的基因用於CD133＋肝癌幹細胞治療，觀察其抗癌作用及細胞傳導通路各位點基因和蛋白的變化，為以CD133＋肝癌幹細胞為靶點的基因治療開闢新途徑，也為復發難治肝癌治療的轉化性研究提供重要數據。
結題摘要
肝細胞癌是世界範圍內公認的嚴重致死性的惡性腫瘤之一，復發、轉移、耐藥等各種因素嚴重限制了其療效的提高。腫瘤幹細胞理論認為，肝癌的上述特點起源於腫瘤幹細胞的存在。其中，CD133作為肝細胞癌腫瘤幹細胞的重要標誌物之一，被認為是治療難治復發肝細胞癌的重要靶點。抑癌基因MDA7/IL-24具有誘導凋亡，抑制血管新生、增加放化療敏感性等多重抗癌效應。這些作用恰恰與CD133＋腫瘤幹細胞的生物學特徵相拮抗，作用機制的信號傳導通路也有多重位點交叉。本研究主要通過篩選CD133＋的肝癌腫瘤幹細胞，並建立CD133＋肝細胞癌的動物模型。分析IL-24受體在CD133＋肝癌幹細胞及其肝癌組織中的表達情況，並將慢病毒介導的MDA7/IL-24基因作用於CD133＋的肝癌腫瘤幹細胞，觀察其細胞實驗和動物實驗的抗癌效應及細胞傳導通路各位點基因和蛋白的變化。結果顯示，通過流式細胞儀分選CD133＋的肝癌腫瘤幹細胞，並通過成球實驗明確了其幹細胞的特性。並套用富含CD133＋的肝癌腫瘤幹細胞的細胞系在小鼠體內進行成瘤實驗，驗證了其較高的成瘤性。套用化療藥物的作用，驗證了其對化療藥物的抵抗性。並通過Western Blot的方法檢測了Huh-7, SMMC-2771等細胞中IL-24受體IL-20R1/IL-20R2、IL-22R1/IL-20R2的表達，但是僅檢測了IL-20R1，其受體表達較弱。另一方面，成功構建了過表達MDA7/IL-24的慢病毒顆粒，並通過細胞功能實驗證實了其對CD133＋的肝癌腫瘤幹細胞的抗癌效應。進一步通過晶片的篩查，證實了其對BCL2的顯著下調和CCND1的顯著上調，而其他基因篩查無變化。通過上述結果證實，CD133＋的肝癌腫瘤幹細胞無論在體內還是體外均有較高的成瘤性，Huh-7, SMMC-2771細胞中僅表達較弱的IL-20R1，其他受體不表達。但是，套用過表達MDA7/IL-24的慢病毒顆粒進行細胞功能實驗，證實了其對肝癌細胞系的抗增值、誘導凋亡的作用，基因晶片篩查發現了BCL2的顯著下調和CCND1的顯著上調，結合MDA7/IL-24的特性，可能通過旁分泌作用起到抗腫瘤的作用。這些都為以CD133+肝癌幹細胞為靶點的基因治療開闢了新途徑，也為復發難治肝癌的轉化性研究提供了依據。
