LncRNA-AV310809在腹膜透析相關腹膜纖維化中的作用及機制研究

《LncRNA-AV310809在腹膜透析相關腹膜纖維化中的作用及機制研究》是依託南昌大學，由魏昕擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：LncRNA-AV310809在腹膜透析相關腹膜纖維化中的作用及機制研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：魏昕
• 依託單位：南昌大學

項目摘要

腹膜纖維化是影響腹膜透析效果，導致患者退出腹透最主要的原因，目前，其發生及調控機制尚不明確，仍無有效的解決辦法。在前期研究中，我們構建腹膜透析相關腹膜纖維化動物模型，並通過基因晶片進行了腹膜纖維化差異lncRNA的篩選，發現lncRNA-AV310809在纖維化的腹膜組中顯著高表達，而上調AV310809的表達可促進腹膜間皮細胞EMT的發生及細胞外基質的合成。通過Pathway、Network分析，我們進一步發現AV310809與纖維化相關信號通路-Wnt通路中的重要基因Wnt2和Wnt5的表達呈高度正相關。因此，我們推測AV310809可能參與了腹膜纖維化的發生及調控。基於以上前期工作，本課題擬從動物，細胞及分子水平驗證AV310809表達與腹膜纖維化的關係，並明確其對Wnt信號通路的調控作用，從而揭示腹膜透析相關腹膜纖維化發生的新機制，為臨床腹膜纖維化的治療提供新的潛在藥物治療靶點。

結題摘要

研究背景：通過前期lncRNA基因晶片篩選，我們尋找到了與腹膜纖維化相關的關鍵性長鏈非編碼RNA（lncRNA-AV310809），共表達網路分析預測其可能通過纖維化信號通路（Wnt2/β-catenin信號通路）發揮作用。本研究進一步通過體外實驗探討該關鍵性lncRNA在腹膜纖維化過程中的作用及具體調控機制。 研究內容：1、體外建立腹膜間皮細胞間質轉分化（EMT）模型；觀察TGF- β1對wnt2/β-catenin信號通路的影響。2、體外過表達AV310809觀察HMrSV5細胞形態的變化；以及對Wnt2/β-catenin信號通路的影響。3、運用MTT及劃痕損傷實驗觀察AV310809對HMrSV5細胞增殖及遷移的影響。4、RIP驗證AV310809與β-catenin的相互作用。 主要結果：1、TGF- β1可誘導HMrSV5細胞EMT發生 2、TGF- β1在誘導HMrSV5細胞發生EMT的同時上調了AV310809的表達水平；3、TGFβ-1在誘導HMrSV5細胞發生EMT的過程中Wnt2/β-catenin信號通路被活化4、過表達AV310809促進了TGF-β1 誘導的HMrSV5細胞梭形樣形態改變；過表達AV310809促進了TGF-β1 誘導的HMrSV5細胞EMT的發生；過表達AV310809促進了TGF-β1 誘導的HMrSV5細胞Wnt2、β-catenin蛋白表達增加；AV310809可能抑制了HMrSV5細胞增殖及遷移修復能力。 科學意義：本項目研究發AV310809可能通過激活Wnt2/β-catenin信號通路促進TGF- β1誘導的HMrSV5細胞EMT發生而參與腹膜纖維化過程，提示AV310809可能作為臨床腹膜纖維化治療的潛在干預靶點。