《Linc-ROR/ATG9B誘導自噬調控宮頸癌放療敏感性的機制研究》是依託西安交通大學，由王娟擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：Linc-ROR/ATG9B誘導自噬調控宮頸癌放療敏感性的機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：王娟
- 依託單位：西安交通大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
放射抵抗是宮頸癌治療失敗的主要原因。長鏈非編碼RNA ROR（linc-ROR）與腫瘤的發生、侵襲、轉移及耐藥等密切相關。課題組前期研究發現linc-ROR及自噬相關蛋白9B（ATG9B）的表達與放療抵抗正相關，且敲除linc-ROR後細胞中ATG9B的表達下調，結合文獻報導及生物信息學分析，本課題擬通過：（1）採用qRT-PCR、原位雜交等方法，從細胞、動物、臨床標本等不同水平觀察linc-ROR的表達與宮頸癌放射抵抗的關係；（2）敲除或過表達linc-ROR，觀察linc-ROR與輻射誘導宮頸癌細胞自噬的關係；（3）進一步套用siRNA、螢光素酶報告基因、RIP等技術，揭示linc-ROR通過miR-145調控靶基因ATG9B的作用機制以及影響宮頸癌放射敏感性的機制。預期闡明linc-ROR可能靶向調節ATG9B誘導自噬導致宮頸癌產生放射抵抗的機制，為宮頸癌的放療增敏研究提供新的靶點。
結題摘要
宮頸癌是女性最常見的惡性腫瘤之一，其發病率及病死率均較高，嚴重危害婦女健康，放射治療是主要治療手段。目前研究表明影響放射治療效果的主要原因在於腫瘤組織內在的放射敏感性差異。因此，探討宮頸癌放射抵抗生物學機制，對於提高放療療效，改善患者預後具有十分重要的意義。最新研究發現，LincROR與肝癌和結直腸腫瘤放射敏感性密切相關。本課題首先套用qRT-PCR、流失細胞儀、MTT以及細胞克隆等方法檢測宮頸癌組織樣本及宮頸癌細胞系，結果發現linc-ROR的表達與細胞增殖呈正相關，與凋亡及放射敏感性呈負相關；並且發現linc-ROR的表達與miRNA145呈負相關而與ATG9B的表達呈正相關。電鏡及MDC染色檢測linc-ROR上調或抑制的轉染細胞經照射後，結果發現overROR-Siha細胞中的自噬水平明顯升高，而siROR-SihaR細胞自噬水平降低。共轉染細胞系mimics NC LincROR siha；miRNA145 mimics LincROR siha；inhibitor NC shROR siha-R；miR145 inhibitor shROR siha-R，上述細胞系經4Gy照射後，細胞克隆結果表明miRNA145 mimics LincROR siha較mimics NC LincROR siha明顯減少；而miR145 inhibitor shROR siha-R較inhibitor NC shROR siha-R明顯增多。套用電鏡及MDC染色檢測上述轉染細胞的自噬水平，結果表明miRNA145 mimics LincROR siha細胞中的自噬水平較mimics NC LincROR siha下降，而miR145 inhibitor shROR siha-R較inhibitor NC shROR siha-R細胞的自噬水平升高。體內實驗結果進一步驗證上述實驗結果。以上研究結果說明linc-ROR調控宮頸癌放射敏感性是通過改變宮頸癌細胞中linc-ROR及miR-145的表達，證實了linc-ROR通過miR-145調控其靶基因ATG9B調節自噬影響宮頸癌的放射敏感性。該課題探討了宮頸癌放射抵抗的生物學機制、為宮頸癌放射敏感性的預測指標及放射增敏提供了新的實驗數據，對於提高腫瘤局控率，改善患者預後以及實施個體化治療具有十分重要的意義。
