《Lefty蛋白抗積水腎纖維化作用及其機制研究》是依託武漢大學，由張傑擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：Lefty蛋白抗積水腎纖維化作用及其機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：張傑
- 依託單位：武漢大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
如何有效治療腎臟纖維化是臨床上亟待攻克的難題。理想的方法應當是既能減少膠原基質的生成又能促進其降解，但目前鮮有報導。我們前期研究中首次發現，人重度積水腎組織中lefty基因表達明顯下調（-13.55倍），並在體外細胞培養中證實Lefty蛋白與腎纖維化關係密切；通過基因轉染令細胞高表達Lefty後，可有效抑制TGF-β1誘導的肌成纖維細胞（MyoF）活化以及膠原蛋白的合成。本申請項目擬進一步套用串聯親和純化（TAP）和生物質譜技術，在體外培養的細胞中尋找介導Lefty抗纖維化作用的靶蛋白；套用細胞共定位技術明確其胞內分布特點；套用轉基因小鼠建立可復性CUUO模型，採用靶蛋白shRNA慢病毒載體局部注射，驗證Lefty抑制積水後腎纖維化的體內效應；從而分析Lefty蛋白抑制膠原生成、促進膠原降解，產生雙效應的分子機制。為臨床延緩積水腎損害或促進腎功能恢復的防治奠定基礎。
結題摘要
有效治療腎臟纖維化是臨床上亟待攻克的難題。理想的方法是既能減少膠原基質的生成又能促進其降解，但目前鮮有報導。我們前期研究中發現，人重度積水腎組織中Lefty基因表達明顯下調；通過基因轉染細胞獲得高表達LeftyA後，可有效抑制TGF-β1誘導的肌成纖維細胞（MyoF）活化以及膠原蛋白的合成；這些前期研究證實Lefty蛋白與腎纖維化關係密切。本課題項目進一步套用基因晶片和免疫螢光定位等技術，在體外培養的細胞中尋找介導Lefty抗纖維化作用的靶蛋白；套用細胞共定位技術明確其胞內分布特點；套用小鼠建立可復性CUUO模型，採用腺病毒載體介導的Lefty局部注射，驗證Lefty抑制積水後腎纖維化的體內效應；從而分析Lefty蛋白抑制膠原生成、促進膠原降解，產生“雙效應”的分子機制。為臨床延緩積水腎損害或促進腎功能恢復的防治奠定基礎。
