《Laminin-511在非瘢痕性脫髮疾病中的作用》是高晶為項目負責人，寧波大學為依託單位的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：Laminin-511在非瘢痕性脫髮疾病中的作用
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：高晶
- 依託單位：寧波大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
Laminin-511 是皮膚基底膜的重要組成成分。我們的成果顯示Laminin-511在毛髮的胚胎髮育期起關鍵調控作用。按照老鼠成體毛髮循環再生的不同階段，體內注射外源性Laminin-511，發現其加快毛髮循環再生的生長期啟動，並延緩向退行期進展。此項目，我們將對Laminin-511調控毛髮循環再生和非瘢痕性禿髮的機理進行研究。套用體內細胞移植術驗證Laminin-511調控毛髮上皮-真皮的信號傳導。在非瘢痕性禿髮樣本中用Real-time PCR、免疫螢光染色、流式細胞、及Lable-Retaining Assay尋找毛髮生長因子及上皮幹細胞分化因子的缺陷（Wnt、Shh、Noggin、BMP、KRT15、CD200及CD34等）。最後套用外源性Laminin-511蛋白對非瘢痕性脫髮進行信號修復，從而揭示Laminin-511調控非瘢痕性禿髮的分子信號學機理。
結題摘要
目的 通過創建二氫睪酮（DHT）誘導的雄激素性脫髮（AGA）小鼠模型，研究DHT與毛囊循環再生中的分子信號學機理。從而為進一步清楚地闡明AGA發病機制，並為具有抑制毛囊脫落和促進毛囊再生的活性大分子藥物研發建立堅實的理論依據。 方法 利用DHT濃度梯度法結合有機載體對正常適齡雌性小鼠進行皮下給藥，並通過人工脫毛使小鼠毛髮生長周期同步化。通過H&E染色觀察DHT處理後不同時期毛囊形態結構以及毛囊數目的改變；通過RT-PCR鑑定AGA標準性DHT信號傳導通路關鍵突變基因，確定AGA小鼠模型的建立。最後，利用RT-PCR對影響不同時期毛囊循環再生的關鍵信號通路（包括：毛囊幹細胞標誌物、細胞外基質主要成分以及促毛髮生長有關信號分子）進行篩查，建立AGA的細胞分子學致病機理。 結果 通過H&E染色觀察發現在不同濃度DHT後的小鼠在毛髮生長不同階段均表現出典型的毛囊小型化和頭髮稀疏。RT-PCR結果顯示，在整個毛髮生長周期中AR表達水平幾乎都呈上升趨勢，而在D40和D48天呈下降趨勢。通過對毛囊幹細胞表面標誌物的mRNA表達水平進行分析發現，Lgr5的表達水平在Telogen-Anagen VI期之間呈下降趨勢，而CD34的表達水平無明顯變化。在進一步的研究中我們發現，當外源增加DHT含量，細胞內AR含量也相應增加，促毛髮生長因子FGFR、IGF-BP5、Ptch1以及Wnt信號表達水平降低；但在D40和D48天AR含量沒有明顯增加，甚至呈下降趨勢，而細胞內的PDGFRα的表達水平與對照組相比明顯降低。而對細胞外基質的表達分析發現，在D12和D52天laminin α3的表達水平上調，而在D12、D48和D52天laminin α5的表達水平下調。 結論 DHT處理後小鼠皮膚中促毛髮生長因子FGFR、IGF-BP5、Ptch1以及Wnt信號的表達呈下降趨勢，表明DHT能夠活化DP細胞中的AR受體，與毛囊上皮細胞相互作用，對促毛髮生長因子FGFR、IGF-BP5、Ptch1以及Wnt信號的表達產生抑制作用。此外，DHT處理後小鼠皮膚中laminin-511與laminin-332的合成與分泌異常，表明DHT最終通過調節細胞外基質中laminin的組成對毛囊幹細胞的活化以及細胞遷移、分化發揮調控作用，使個體表現出毛髮生長遲緩，毛囊分布不均等多種病理特徵。
