《LKB1通過調控sestrin2影響肺癌細胞自噬活性的機制研究》是依託西安交通大學，由梁璇擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：LKB1通過調控sestrin2影響肺癌細胞自噬活性的機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：梁璇
- 依託單位：西安交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
LKB1是影響肺癌細胞發生、發展及維持細胞內環境穩定的重要基因。我們的前期研究發現LKB1影響肺癌細胞中自噬調節因子sestrin2的表達，過表達LKB1影響肺癌細胞對鉑類化療藥物的敏感性。我們推測LKB1可能通過調控自噬影響肺癌細胞在生長因子缺乏和代謝應激條件下的存活。故本項目擬通過研究內源性或外源性LKB1的表達變化對肺癌細胞自噬活性的影響，證實LKB1是否與sestrin2直接相互作用；並構建LKB1的不同片段的突變體，尋找LKB1可能與sestrin2作用的位點；研究LKB1調控下sestrin2參與的相關信號通路，以明確LKB1在其中所發揮的作用；研究不同時空狀態下LKB1通過sestrin2對肺癌細胞自噬活性的調控作用及可能機制，探討在該過程中自噬和凋亡的相互關係。該項目將有助於闡明LKB1調控肺癌細胞自噬活性的可能機制，為進一步臨床前期研究提供實驗依據。
結題摘要
LKB1是影響肺癌細胞發生、發展及維持細胞內環境穩定的重要基因。我們的前期研究發現LKB1影響肺癌細胞中自噬調節因子sestrin2的表達，推測LKB1可能通過調控自噬影響肺癌細胞在生長因子缺乏和代謝應激條件下的存活。故本項目擬通過研究內源性或外源性LKB1的表達變化對肺癌細胞自噬活性的影響，證實LKB1是否與sestrin2直接相互作用；並構建LKB1的不同截斷體，尋找LKB1可能與sestrin2作用的位點；研究LKB1調控下sestrin2參與的相關信號通路，以明確LKB1在其中所發揮的作用，探討在該過程中自噬和凋亡的相互關係。我們在非小細胞肺癌組織中檢測，LKB1和Beclin1的蛋白和mRNA表達水平均低於配對的癌旁正常組織，二者均與患者的病理組織類型和組織分化程度相關。生存分析顯示LKB1和Beclin1低表達與患者較短的生存期相關，是非小細胞肺癌患者的獨立預後因素。通過慢病毒感染法成功構建LKB1穩定下調的穩轉細胞系，LKB1下調促進H1975和H1299細胞的增殖，可能與其對細胞周期的調控有關；LKB1穩定下調的H1975和H1299細胞的侵襲遷移能力增強，體內成瘤能力也增強。LKB1下調抑制細胞自噬的發生，可能與AMPK-mTOR信號通路有關。siRNA干擾成功下調H1975細胞中SESN2的表達，SESN2下調可能通過抑制AMPK-mTOR信號通路從而抑制細胞自噬的發生。成功構建穩定轉染LKB1截短體的A549細胞系，免疫共沉澱結果顯示LKB1與SESN2之間存在相互作用關係，LKB1通過其中央激酶區與SESN2結合形成複合物。這將有助於我們揭示LKB1基因的具體功能，探索LKB1調控非小細胞肺癌的作用機制，不僅為闡明非小細胞肺癌發生髮展提供重要線索，也為尋找非小細胞肺癌治療的有效靶點提供實驗基礎。
