Klf4/VDR信號通路抑制肝癌生長的機制研究

《Klf4/VDR信號通路抑制肝癌生長的機制研究》是依託上海交通大學，由李琦擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：Klf4/VDR信號通路抑制肝癌生長的機制研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：李琦
• 依託單位：上海交通大學

項目摘要

在乳腺癌、皮膚鱗癌中，轉錄因子Klf4是一種癌基因，但在肝癌中的作用尚不清楚。本課題組初步研究證實，在肝癌細胞和肝癌組織中存在明顯的Klf4表達下降或缺失，肝癌組織中Klf4表達和維生素受體（VDR）表達存在正相關，在VDR的啟動子區域存在Klf4的結合位點。本課題提出Klf4可能是一種肝癌生長抑制因子，調控VDR的轉錄表達，可以抑制肝癌的生長這一假設，以基因轉染、條件性基因敲除作為主要技術手段，通過細胞實驗、建立條件性基因敲除小鼠模型，並結合肝癌臨床蜜項炒病例，尋找Klf4基因影響肝癌生長的直接證據，探索肝癌中Klf4對VDR基因的轉錄調控機制，以及Klf4-VDR信號通路對肝癌細胞增殖、凋亡、侵襲和轉移中的影響，本研究將揭示Klf4/VDR信號通路在肝癌發生中的作用，無疑具有理論意義和臨床套用價值，課題的實施有望為肝癌的治療提供一種新思路和藥物作用新靶點。

結題摘要

Klf4是一個雙重功能轉錄因子，針對不同的靶基因，通過不同的作用機制，發揮激活或抑制轉錄作用。本課題組研究發現，Klf4在肝癌細胞中存在明顯的表達缺失。轉染Klf4基因的肝癌細胞增殖明顯受到抑制，亦影院危迎響了上皮-間質轉化（Epithelial-mesenchymal transition, EMT）相關標記物的表達。1α,25(OH)2D3與細胞膜漿剃設上的維生素D3受體（Vitamin D Receptor，VDR）結合發揮抗腫瘤作用。本課題將以基因轉染、條件性基因敲除作為主要技術手段，通過體外實驗以及結合肝癌臨床病例，尋找Klf4基因影響肝癌生長的直接證據，探索肝癌中Klf4對VDR基因的轉錄調控機制，以及Klf4/VDR信號通路對肝癌細胞增殖、凋亡、侵襲和轉移中的影響，本研究將揭示Klf4/VDR信號通路在肝癌發生中的作用，無疑具有理論意義和臨床套用價值。課題的實施有望為肝癌的治療提供一種新思路和藥物作用新靶點。 研究發現：1. 肝臟細胞和組織中存在明顯的Klf4表達下降或缺失嚷朽蒸連，這提示Klf4是一種肝癌生長抑制因子；2. SK-Hep-1、Hep-G2細胞頁請幾轉染Klf4基因後，肝癌細胞的侵襲和轉移能力明顯下降；3. 不同濃度VitD3對肝癌細胞生長均有抑制作用，這種抑制作用有劑量-時間效應；4. Klf4高表達的正常肝臟組織中， VDR亦呈高表達；Klf4低表達的肝癌組織中，VDR亦呈低表達，Klf4與VDR之間存在正相關。5. 將Klf4基因導入SK-Hep-1和Hep-G2細胞後，觀察到肝癌細胞中VDR基因啟動子活性明顯升高。DNA序列分析顯示，在VDR啟動子區域存在Klf4的兩個結合位點（--CACCC--），我們將利用Chip方法，檢測在VDR基因的啟動子區存在Klf4蛋白的結合位點；將Klf4基因轉染SK-Hep-1、Hep-G2細胞後，VDR啟動子的活性明顯升高。6.通過分析44例肝癌患者臨床病理資料，發現肝癌組織中Klf4與VDR表達存在正相關，Klf4表達情況與腫瘤分化程度相墊組關，高表達者患者預後較好。 結合miRNA在肝癌中的研究進展，本研究還探索性姜市贈求研究了miRNA對Klf4調控作用，此研究為新增內容。 以上結果表明： Klf4是一種肝癌生長抑制因子，Klf4通過與VDR啟動子位點的結合而調控VDR的轉錄與表達。