《KSR1與Raf結合調控ERK1/2信號誘導肝癌索拉非尼耐藥機制研究》是依託復旦大學，由施國明擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：KSR1與Raf結合調控ERK1/2信號誘導肝癌索拉非尼耐藥機制研究
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：施國明
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
索拉非尼因可阻斷Raf信號等已成為晚期肝癌治療一線藥物，但其客觀反應率僅41.6%，學者認為此與耐藥有關。我們前期研究證實高Cryab表達肝癌細胞對其耐藥(Hepatology,2013)；最近用雷射顯微切割後iTRAQ檢測等發現KSR1在索拉非尼耐藥肝癌組織與細胞系中表達顯著高於非耐藥組，且免疫組化/螢光顯示p-KSR1核表達更為明顯，這與p-KSR1通過影響胞漿Raf信號獲得功能相餑。為此我們提出假說：KSR1通過Raf或磷酸化後核易位介導肝癌索拉非尼耐藥。故我們通過檢測肝癌組織KSR1與p-KSR1表達，明確其與索拉非尼耐藥關係；調節肝癌KSR1表達，用免疫共沉澱結合質譜篩選、KEGG分析、pull-down及構建KSR1不同結構域質粒等探討KSR1誘導索拉非尼耐藥機制；體內驗證。本研究將從KSR1不同亞細胞定位這個新視點揭示肝癌索拉非尼耐藥機制，為索拉非尼耐藥患者提供新治療靶點。
結題摘要
索拉非尼是晚期肝癌治療經典一線藥物，耐藥是限制其臨床套用的瓶頸。我們採用雷射顯微切割結合iTRAQ檢測發現KSR1在索拉非尼耐藥肝癌組織表達顯著高於索拉菲尼敏感組，免疫組化/螢光顯示p-KSR1定位於肝癌細胞的細胞核，高表達KSR1和p-KSR1肝癌患者預後明顯差於低表達者；上調KSR1表達促進肝癌細胞生長、侵襲、轉移和索拉菲尼耐藥，下調KSR1表達抑制肝癌細胞生長、侵襲和轉移；免疫共沉澱結合質譜研究顯示KSR1與DDX5形成複合物；干擾DDX5表達顯著降低肝癌細胞克隆形成能力和遷徙，促進肝癌細胞凋亡，逆轉KSR1誘導的索拉菲尼耐藥；DDX5在肝癌組織中表達明顯高於癌旁，高表達DDX5肝癌患者預後較差；生存分析顯示共高表達DDX5、p-KSR1的肝癌患者預後最差。我們的研究揭示了KSR1在肝癌索拉非尼耐藥中的作用及機制，KSR1可作為索拉菲尼耐藥肝癌患者預測預後的參數和新的治療靶點。
