ISH

英文全稱是 ：in situ hybridization。原位雜交。指將特定標記的已知順序核酸為探針與細胞或組織切片中核酸進行雜交，從而對特定核酸順序進行精確定量定位的過程。

基本介紹

• 外文名：ISH
• 英文全稱：：in situ hybridization
• 套用：細胞特異性mRNA轉錄的定位
• 原理：是兩條核苷酸單鏈片段

套用

①細胞特異性mRNA轉錄的定位，可用於基因圖譜，基因表達和基因組進化的研究；

②感染組織中病毒DNA/RNA的檢測和定位，如EB病毒mRNA、人類乳頭狀瘤病毒和巨細胞病毒DNA的檢測；

③癌基因、抑癌基因及各種功能基因在轉錄水平的表達及其變化的檢測；

④基因在染色體上的定位；

⑤檢測染色體的變化，如染色體數量異常和染色體易位等；

⑥分裂間期細胞遺傳學的研究，如遺傳病的產前診斷和某些遺傳病基因攜帶者的確定，某些腫瘤的診斷和生物學劑量測定等。

意義

在研究DNA分子複製原理的基礎上發展起來的一種技術。其基本原理是兩條核苷酸單鏈片段，在適宜的條件下，能過氫鍵結合，形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 雙鍵分子的特點，套用帶有標記的（有放射性同位素，如3H、35S、32P、螢光素生物素、地高辛等非放射性物質）DNA或RNA片段作為核酸探針，與組織切片或細胞內待測核酸（RNA或DNA）片段進行雜交，然後可用放射自顯影等方法予以顯示，在光鏡或電鏡下觀察目的 mRNA或DNA 的存在並定位；用原位雜交技術，可在原位研究細胞合成某種多肽或蛋白質的基因表達。此方法有很高的敏感性和特異性，可進一步從分子水平來探討細胞的功能表達及其調節機制。已成為當今細胞生物學、分子生物學研究的重要手段。