IL-17通過miRNA調控小鼠重症哮喘發病作用機制的研究

《IL-17通過miRNA調控小鼠重症哮喘發病作用機制的研究》是依託西安交通大學，由常穎擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：IL-17通過miRNA調控小鼠重症哮喘發病作用機制的研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：常穎
• 依託單位：西安交通大學

中文摘要

IL-17是重症哮喘中的重要致病因子，其作用通路尚未闡明，已有文獻和本項目組前期研究結果提示miRNA是IL-17調控疾病進展的重要手段。本項目擬基於前期篩選得到的在重症哮喘中與IL-17相關的miR-207和miR-5112，研究IL-17通過miRNA對重症哮喘的調控及機制。首先，將進一步明確疾病中IL-17對miRNA表達的影響，通過原位雜交與雷射捕獲顯微切割技術和q-PCR定位miRNA的差異表達，並通過細胞轉染miRNA靶基因螢光素酶報告質粒明確其對靶基因的調控；其次，採用細胞轉染miRNA模擬物或抑制物，研究其對Th2細胞分化、氣道平滑肌細胞分泌與增殖以及NF-KB和PI3K信號通路的調控作用；最後，通過小鼠重症哮喘模型探討在體干預miRNA表達對重症哮喘發病的影響及機制。本項目是重症哮喘發病機理研究與miRNA研究結合的新發展，為探討以miRNA為潛在調控手段做出有益的嘗試。

結題摘要

哮喘是一種以可逆性氣流受限為特徵的氣道慢性炎症性疾病，發病率和死亡率呈現上升趨勢。哮喘中對患者健康生命威脅最大的是重症哮喘，到目前為止，臨床仍缺乏有效治療措施。新近研究以及本項目組前期研究結果表明，Th17細胞數量及其分泌的細胞因子IL-17A/F在重症哮喘發病中起重要作用。miRNA在哮喘發生髮展中的作用已日益受到關注，研究顯示一些miRNA在哮喘患者中表達失調。但由於研究時間短，與IL-17相關的miRNA對重症哮喘的調節作用及其機理尚未闡明。前期工作中我們對IL-17基因缺失小鼠重症哮喘模型進行了miRNA表達譜分析，發現miR-365-3p低表達與IL-17致病作用相關。本項目中我們對IL-17通過miR-365-3p在重症哮喘中起致病作用及機制進行了深入研究。首先，miR-365-3p在小鼠肺組織中主要表達於氣道平滑肌細胞和炎症細胞中，重症哮喘模型小鼠上述細胞中的miR-365-3p表達明顯減低。ARRB2和PIK3R3為其中與哮喘發病相關的靶基因。體外給予小鼠肺泡支氣管上皮細胞IL-17刺激，發現IL-17可顯著降低miR-365-3p的表達水平，同時ARRB2和PIK3R3的表達水平增高。其次，miR-365-3p抑制物能夠促進氣道平滑肌細胞炎症因子的表達和增殖，同時激活PI3K通路。最後，miR-365-3p的模擬物可使重症哮喘模型小鼠氣道阻力下降，炎性細胞浸潤減低，膠原蛋白沉積減少，氣道平滑肌面積減少。本項目是對重症哮喘中IL-17通過miRNA對發病關鍵環節起作用的首次探索，是重症哮喘發病機理研究與miRNA研究結合的新發展，為探討以miRNA為潛在調控手段做出了有益的嘗試。