《H9亞型流感病毒跨種屬傳播的分子機制研究》是依託汕頭大學，由王嘉擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：H9亞型流感病毒跨種屬傳播的分子機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：王嘉
- 依託單位：汕頭大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
禽流感病毒向哺乳動物宿主傳播一直被認為是可導致人類流感大流行的一個潛在威脅。在過去20年間，H9病毒曾多次感染人類及豬群，這使得人們高度關注該亞型是否有可能在人群中引發下一次流感大流行。然而，至今H9病毒跨種屬傳播的機制仍未明確。在我們的前期研究工作中，我們發現目前流行於我國的多個H9病毒代表株均可感染豬，而早期流行於水禽中的Dk/ST/2030/2000病毒則不感染豬。這為我們研究H9病毒跨種屬傳播的分子機制提供了契機。在本項目中，我們將通過反向遺傳技術構建具備不同基因來源（來自對豬有/無感染性的病毒）的重組病毒並評估其對家豬的感染性，從而鑑定對病毒跨種屬傳播具決定性或輔助性作用的基因；在此基礎之上，我們還將通過構建點突變株鑑定各基因上對病毒跨種屬傳播具決定性作用的位點，進而明確H9病毒跨種屬傳播的分子機制。此研究有助於從基因水平鑑定對哺乳動物有傳染性的H9病毒,為大流感的防治奠定基礎。
結題摘要
由於家豬孵育了歷史上4次流感大流行株，因此，禽H9N2病毒向豬的跨種屬傳播增加了病毒發生哺乳動物適應性改變的危險。但迄今H9病毒跨種屬屏障的機制仍未為人所知。在我們的前期研究中，我們發現G1和Y280系的病毒可感染豬，而來自於天然宿主的H9病毒對豬沒有感染性，提示H9病毒在陸禽中的進化可能提高了病毒對豬的感染性。據此，我們通過置換對豬有/無感染性的H9病毒表面基因，研究表面基因在病毒跨種屬傳播中的作用。 研究發現：（1）可感染豬的H9病毒（Ck/HK/SSP177W/2007，SSP177W）可逆轉兩株不能感染豬的H9病毒（Dk/ST/2030/00，ST2030和Dk/JX/7554/2007，JX7554）對豬的感染性。僅靠SSP177W的HA基因就可使ST2030病毒獲得感染性；（2）H9病毒的表面基因對病毒的複製能力具有重要影響。具有SSP177W病毒一或兩條表面基因的重組毒株都獲得了複製優勢，而SSP177W表面基因一旦為ST2030或JX7554取代則複製效率顯著減低；（3）具SSP177W表面基因的病毒顯示出對α2, 6唾液酸受體更強的親和力；（4）通過對豬有/無感染性兩組病毒HA基因的序列分析，我們發現了6個可能與病毒跨種屬傳播能力有關的胺基酸位點（I38T、T47A、A335R、E381K、N473K、Q498R）。這些胺基酸自九十年代就開始出現於在陸禽中流行的H9病毒中，在2000年後絕大部分H9病毒的相應位點上都帶有這些位點，提示禽H9病毒在陸禽中的分子進化可能使病毒獲得對豬的感染性；（5）將ST2030上述6個位點突變為SSP177W病毒的對應胺基酸後，該突變株獲得了對豬的感染性，驗證了這些突變點對H9病毒感染豬的決定性作用；（6）在這6個位點中，我們發現僅靠HA1或HA2的突變不足以使病毒獲得感染性；儘管HA-335位作為HA1-HA2連線位點的組成部分，影響著病毒的熱穩定性，但不具335R突變的病毒仍能感染豬；HA1上的1個突變與HA2上2個突變的組合是滿足病毒獲得對豬的感染性的最低要求。 本研究揭示了表面基因、尤其是HA基因在H9病毒跨種屬傳播中的決定性作用，並首次揭示了HA基因上決定禽H9病毒感染豬的分子決定簇，為深入了解禽流感病毒跨種屬機制奠定了基礎。
