《H2S/CSE信號通路對照射後殘餘肝癌細胞侵襲轉移潛能的影響》是依託復旦大學，由潘燕擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：H2S/CSE信號通路對照射後殘餘肝癌細胞侵襲轉移潛能的影響
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：潘燕
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
原發性肝癌(HCC)是目前我國最常見且病死率較高的惡性腫瘤之一，其放療後易轉移復發是目前肝癌治療中亟待解決的重要問題。我們最近的研究結果表明H2S/CSE途徑在肝癌細胞和正常肝細胞L02中的表達存在顯著差異，提示這種差異可能與肝癌惡性轉化相關。本項目將以不同p53基因型的肝癌細胞以及血管內皮細胞HUVEC為研究對象，建立H2S/CSE穩定或短暫低表達細胞株，研究H2S/CSE途徑對照射前後肝癌細胞生物學行為的影響及其分子機制，重點研究H2S/CSE途徑在照後殘餘肝癌細胞侵襲轉移與再生長潛能的影響，照後殘癌細胞對周圍血管生成的影響以及H2S/CSE途徑在其中的作用，並研究其中H2S/CSE途徑與P53，VEGF/VEGFR，EGFR，MAPK等通路之間的作用網路。本項目的完成有望為探明腫瘤細胞放療後侵襲轉移潛能改變的機制提供新的思路，並為提高肝癌放療效果提供新的線索。
結題摘要
越來越多的證據表明，放射可促進腫瘤細胞侵襲與轉移，但其中的機制尚不清楚。H2S已被證實是繼NO和CO後又被發現的一種新型的氣體信號分子，然而其在腫瘤生物學，特別是放療後腫瘤細胞侵襲能力加強這一現象中的調控作用尚未明確。 首先，我們發現多種肝癌細胞中的CSE表達要遠遠高於其在正常肝細胞中的表達，且H2S/CSE信號體系對肝癌細胞的惡性增殖起促進作用。採用siRNA技術或CSE的專一性抑制劑PPG可明顯降低HepG2細胞的惡性增殖，並可顯著增加內源性ROS的生成並大幅降低線粒體膜電位，從而誘導細胞凋亡。推測這種改變是H2S/CSE途徑調節肝癌細胞惡性增殖的重要原因之一。更重要的是，抑制內源性H2S的合成可通過抑制ERK通路的激活阻斷了EGF/EGFR通路的信號傳導，從而減少肝癌細胞的增殖信號。 其次，我們發現兩株肝癌細胞系HepG2和PLC/PRF/5在X射線照射後侵襲能力顯著增強，間質細胞標誌蛋白N-cadherin和Vimentin表達量顯著增加，而上皮細胞標誌蛋白E-cadherin的表達則明顯降低。snail作為EMT過程中最重要的調控因子，同樣在受照射後顯著增加。內源性H2S產生酶CBS和CSE表達及磷酸化p38均隨著培養時間的延長而增加。CSE干擾或抑制後，肝癌細胞輻射敏感性增加，侵襲和遷移能力降低，EMT轉化同樣下降。輻射所誘導HepG2的p-p38的高表達能夠被PPG或者CSE siRNA所抑制，p38抑制劑SB203580預處理僅降低EMT水平，而對細胞CBS及CSE的表達無影響。 最後，輻射可增加照射後殘餘肝癌細胞 的侵襲與遷移，並伴隨有N-cadherin，Snail，以及p-P38 的過表達。此外，照後殘餘HepG2 細胞中的CSE和CBS的表達較未受照細胞也顯著增加。干擾CSE或CBS表達，均可降低照後殘癌細胞的侵襲與轉移，同時N-cadherin，snail，p-P38的表達也顯著下降。此外，干擾CSE後細胞侵襲遷移下降程度高於CBS干擾的殘癌細胞。P38抑制劑SB203580可通過抑制EMT轉化來降低照後殘癌細胞的侵襲遷移水平。 綜上所述，本項目發現HS/CSE途徑不僅可調控肝癌細胞的增殖及輻射敏感性，同時還可通過調控受照射細胞的EMT轉化來調控照後及照後殘癌細胞的侵襲與遷移。因此，為探明腫瘤細胞放療後侵襲轉移潛能改變的機制提供新的思路。
