Golga3的蛋白功能及與Golga3(repro27)雄鼠不育分子機制的研究

Golga3的蛋白功能及與Golga3(repro27)雄鼠不育分子機制的研究

《Golga3的蛋白功能及與Golga3(repro27)雄鼠不育分子機制的研究》是依託鄭州大學,由宋寧擔任項目負責人的聯合基金項目。

基本介紹

  • 中文名:Golga3的蛋白功能及與Golga3(repro27)雄鼠不育分子機制的研究
  • 項目類別:聯合基金項目
  • 項目負責人:宋寧
  • 依託單位:鄭州大學
項目摘要,結題摘要,

項目摘要

Golga3(repro27)突變鼠表現出生殖細胞缺陷進而導致睪丸萎縮,其附睪產生的精子濃度和活動性下降,且這些精子會導致體外受精失敗。初步研究表明Golga3在睪丸中的細胞凋亡信號通路和高爾基體複合物動態變化中起到作用,但是Golga3基因突變導致不育的具體分子機制還需進一步的探討。老鼠與人的GOLGA3胺基酸序列結構相似,可推測與含有PDZ和捲曲螺旋基序的與高爾基體相關的蛋白(GOPC)相互作用。在本研究中,我們擬利用酵母菌雙雜交實驗方法鑑別出在睪丸中與Golga3相互作用的蛋白,並且利用蛋白組學分析鑑別出突變老鼠和對照鼠中有表達量差異的蛋白。通過分析這些相互作用的蛋白質的功能和對不同表達量的蛋白構建功能網路,探究導致雄鼠不育的具體分子機制。本研究以發掘Golga3的蛋白功能為新視點,為探究Golga3突變導致雄鼠不育的發生機制奠定基礎,為男性不育的診斷和治療提供新的思路。

結題摘要

Gogla3基因突變雄鼠的精子發生過程出現缺陷。首先本課題組利用免疫螢光的方法檢測到golga3蛋白在所有生精上皮周期中均有表達。同時在GC-2spd(ts)細胞系中,利用siRNA干擾Golga3的表達,我們發現干擾組細胞增殖速度降低,細胞凋亡增加,表明Golga3在該細胞增殖和活性上起到重要作用。為了發現與Golga3相互作用的蛋白質,在NIH3T3細胞中課題組利用免疫共沉澱的方法,通過Golga3抗體免疫沉澱與Golga3相互作用的蛋白,發現了好幾個相互作用的蛋白質。在這些蛋白中,碳酸酐酶II(Carbonic Anhydrase II)引起了我們的關注。因為有研究報導稱碳酸酐酶II的缺失導致精子活力和擺動速率降低,以此我們推測CAII的降低導致Golga3缺陷小鼠精子活力的降低,但是Golga3突變小鼠中其他缺陷(例如異常的頭部和尾巴等)的原因需要進一步的研究。總之,本課題組第一個較詳細、系統的研究了Golga3的功能,並且發現一些與Golga3精子發生障礙相關的線索。相信,本課題組的研究對Golga3在精子發生中作用的揭示提供了重要的信息。我們將進一步研究揭示Golga3蛋白與精子發生的關係。

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