《Ghrelin以群體感應調節骨肉瘤轉移相關蛋白Ezrin表達機制研究》是依託上海交通大學，由李洪濤擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：Ghrelin以群體感應調節骨肉瘤轉移相關蛋白Ezrin表達機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：李洪濤
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
骨肉瘤診斷時20%的患者已發生了轉移，預後不佳。研究表明Ezrin與骨肉瘤轉移呈正相關，尋找Ezrin表達調控基因可為轉移防治開發新靶點。已知Ezrin表達受細胞密度調控，且細胞密度亦可改變腫瘤轉移特性，但確切機制不明。對比發現，細胞群體密度依賴特性與細菌群體感應（Quorum sensing,QS）現象高度相似，而細菌QS中核心因子與Ghrelin的具有相同化學結構，提示Ghrelin可能參與調節Ezrin的表達。我們研究驗證了Ezrin與骨肉瘤轉移相關，發現了Ghrelin的表達與腫瘤細胞密度呈正相關，且較高濃度Ghrelin能對骨肉瘤細胞發揮促侵襲效應。因此我們推測：Ghrelin能以細胞群體感應方式調節Ezrin表達改變腫瘤細胞轉移特性。據此，本研究根據前期基礎，以骨肉瘤細胞和骨肉瘤動物模型為研究對象，探討Ghrelin在上述模式下調節Ezrin表達並改變轉移特性中的作用。
結題摘要
為建立體外細胞群體感應系統在腫瘤細胞轉移性調節ezrin表達的研究方法，我們試圖擴增ezrin基因啟動子區2.36Kb片段克隆至psiCHECK+Neo載體上。選擇了U2OS細胞作為Ezrin-luciferase穩定株篩選，通過不同濃度Ghrelin干預Ezrin-luciferase穩定株，並未發現預期陽性結果，為分析ezrin表達上游調節因子，初步選取其中可以促進ezrin表達的基因SP1，Src，RB1作為陽性對照，初篩對314個基因進行了RNAi篩選，得到154個初篩陽性基因pools。針對上述154個陽性基因pools進行qPCR驗證，發現了BRD2,IRAK1,CHD3,PPP2CA,EIF4AK3,HIPK3,DOT1L等7個RNAi片段能有效抑制ezrin基因表達，進一步通過Transwell試驗，我們驗證了抑制其中四個基因片段對U2OS細胞侵襲有影響，具體為IRAK1,CHD3,PPP2CA片段表現為促侵襲，而BRD2片段表現為抑制侵襲效應。
