《Gal-9在維持腸上皮屏障功能中的作用機制研究》是依託鄭州大學，由馮百歲擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：Gal-9在維持腸上皮屏障功能中的作用機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：馮百歲
- 依託單位：鄭州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
我國炎症性腸病(IBD)發病率逐年增高，其確切病因和發病機制仍不清楚。研究表明，腸黏膜屏障受損及功能失調是其病理基礎，異常免疫反應與其發病密切相關。Th1/Th17細胞免疫失衡與IBD發生有關。半乳糖凝集素9(Gal-9)能夠阻止Th1/Th17細胞因子的釋放。Gal-9是否能通過抑制Th1/Th17細胞應答而抑制腸道炎症，從而維持腸上皮屏障功能值得深入研究。我們前期研究發現，小鼠腸上皮細胞(IEC)表達Gal-9並在食物過敏腸黏膜損傷修復中起重要作用；IBD患者IEC表達的Gal-9明顯降低。我們假設：IEC表達的Gal-9可能與腸道炎症發生關係密切。本課題將通過Transwell細胞實驗和動物實驗，利用基因敲出，慢病毒載體轉染，Ussing Chamber等技術來探討Gal-9在腸黏膜損傷及修復中的作用。以期闡明Gal-9在維持腸上皮屏障功能中的機制並為IBD的基因治療提供理論依據。
結題摘要
本課題為1年期面上項目。由於時間和經費的限制，我們僅對Gal-9腸上皮細胞的作用做了初步探討。採用Transwell細胞共同培養系統，利用ELISA、免疫細胞化學、RNAi、FCM、慢病毒轉染等技術方法研究微生物產物、促炎細胞因子等可能影響T84表達Gal-9的因素。後續研究中我們將還要按課題設計內容通過棟實驗探討Th1/Th17相關細胞因子對Gal-9表達及黏膜屏障的影響；特別是慢病毒載體轉染結腸上皮細胞促使其過量表達Gal-9以修復腸道黏膜屏障、恢復腸黏膜屏障功能的研究。 我們的初步研究結果顯示： IBD患者血清及腸黏膜Gal-9水平均降低並與病情輕重均呈正相關性；Th1特異性細胞因子IFN-γ，TNF-α以及Th17特異性細胞因子IL17，IL23水平變化及動物實驗結果初步顯示也與IBD患者相一致；體外實驗顯示：免疫細胞化學和RT-PCR均證明T84細胞表達Gal-9；細菌鞭毛蛋白（Cbir1）能夠抑制T84細胞Gal-9的表達；LPS及PGN的干預，慢病毒載體mGal9Lv轉染小鼠腸上皮細胞實驗正在進行中。
