gus基因

GUS基因就是β-葡萄糖苷酸酶基因(β-glucuronidase)。該基因產物為β-葡萄糖苷酸酶，屬水解酶類，相當穩定而不易降解。有簡易的測定方法，且可使用市售的底物 (substrate) 在原位 (in situ) 顯現出酶的活性，以肉眼即可檢測其產物，非常方便。

基本介紹

• 中文名：基因
• 外文名：dfgsd
• 性質：名詞
• 作用：研究

套用

gus基因存在於E.coli等一些細菌基因組內，編碼β-葡萄糖苷酸酶。β-葡萄糖苷酸酶是一個水解酶，以β-葡萄糖苷酸酯類物質為底物，其反應產物可用多種方法檢測出來。由於絕大多數植物沒有檢測到葡萄糖苷酸酶的背景活性，因此這個基因被廣泛套用於基因調控的研究中。

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檢測方法

根據gus基因檢測所用的底物不同，可以選擇三種檢測方法：組織化學法、分光光度法和螢光法（靈感度為分光光度檢測法最高）。其中最為常用的是組織化學法。

組織化學法檢測以5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖苷酸（X-Gluc）作為反應底物，將被檢材料用含有底物的緩衝液浸泡。若組織細胞發生了gus基因的轉化，並表達出Gus，在適宜的條件下，該酶就可將X-Gluc水解生成藍色產物。這是由其初始產物經氧化二聚作用形成的靛藍染料，它使具Gus活性的部位或位點呈現藍色，用肉眼或在顯微鏡下可看到，且在一定程度下根據染色深淺可反映出Gus活性。因此利用該方法可觀察到外源基因在特定器官、組織，甚至單個細胞內的表達情況。