GFP單抗

GFP單抗，又叫GFP單克隆抗體，或維多利亞水母綠色螢光蛋白單抗，是蛋白質研究過程中非常重要的工具，尤其是在鑑定重組的帶有GFP標籤的蛋白質是否表達或者表達的相對豐度時有著極重要的作用。最常用的GFP單抗基本上都是小鼠單抗，其製備方法和其它的蛋白質的單抗製備過程無異，

概述

GFP單抗，又叫GFP單克隆抗體，或維多利亞水母綠色螢光蛋白單抗，是蛋白質研究過程中非常重要的工具，尤其是在鑑定重組的帶有GFP標籤的蛋白質是否表達或者表達的相對豐度時有著極重要的作用。

GFP單抗

最常用的GFP單抗基本上都是小鼠單抗，其製備方法和其它的蛋白質的單抗製備過程無異，簡單地說就是：重組表達GFP蛋白質作為抗原，也可以人工合成GFP的一段多肽然後偶連載體蛋白作為抗原（一般認為用融合蛋白免疫獲得的抗體質量更好），再免疫小鼠，免疫結束後殺死小鼠取其脾臟，將脾臟細胞與骨髓瘤細胞（通常是SP2/0細胞)融合，體外進行選擇性培養後經過篩選得到陽性克隆，陽性克隆經過亞克隆後形成穩定的細胞株，將此穩定的細胞株進行大規模體外培養或者注射到小鼠腹腔內誘生腹水，再從培養基或腹水中純化得到GFP單抗，經過ELISA和WB鑑定無誤後即可使用。 下圖是Proteintech Group公司的GFP單抗（產品編號：66002-1-Ig)Western blot質檢數據，此WB中使帶有GST標籤的GFP融合蛋白作為檢測蛋白，所以分子量比純GFP分子量大。從圖中可以看出此單抗在常規WB中稀釋20000倍使用完全可以。

Proteintech公司GFP單抗WB結果

SPINDLIN1 promotes cancer cell proliferation through activation of WNT/TCF-4 signaling 一文中，作者就是使用了Proteintech Group的GFP單抗作研究。

GFP背景

GFP即常說的綠色螢光蛋白，最早發現於維多利亞水母，其最大峰值為395nm(紫外)，並有一個峰值為470nm的副峰(藍光)；發射光譜最大峰值為509nm(綠光)，並帶有峰值為540nm的側峰，由於這一特性，所以它被廣泛地套用於分子生物學、遺傳學、生物物理學等諸多領域，不止是在水母體內，在一些珊瑚體內也存在這種蛋白，實驗室中常用的重組GFP標籤更接近水母的GFP，其分子量為27kD左右，但是經過人工改造的GFP的螢光強度比天然的GFP更強，如常聽到的eGFP等，同時經過人工改造，GFP 不只是可以發綠光，還可以發出其它顏色的光，進一步增加了其套用範圍。關於GFP的介紹，可以考慮中文百科GFP詞條。