《Fas/FasL介導小膠質細胞-T細胞Crosstalk與缺血性腦免疫炎症的研究》是依託南京大學，由徐運擔任項目負責人的重點項目。
基本介紹
- 中文名：Fas/FasL介導小膠質細胞-T細胞Crosstalk與缺血性腦免疫炎症的研究
- 項目類別：重點項目
- 項目負責人：徐運
- 依託單位：南京大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
腦免疫炎症反應是影響缺血性卒中預後的主要因素。小膠質細胞與T細胞Crosstalk與卒中後腦免疫炎症的發生髮展和轉歸密切相關。我們首先發現，下調FasL抑制卒中後免疫炎症及小膠質細胞與T細胞相互作用，保護缺血性腦損傷，此作用不依賴Fas/FasL誘導的細胞凋亡途徑。本課題在前期工作基礎上，採用FasL基因突變小鼠、T細胞，膠質細胞FasL基因條件敲除鼠以及GFP鼠，製備基因條件敲除的原代共培養細胞和體內外腦缺血模型，在整體、細胞和分子水平研究Fas/FasL介導小膠質細胞與T細胞Crosstalk在缺血性免疫炎症中的重要作用，闡明調控機制，並臨床轉化研究。本研究將揭示FasL調控卒中後免疫細胞功能在缺血性腦免疫炎症機制中的重要地位；提出FasL在腦-免疫細胞網路中調控免疫細胞功能的新理念；建立以FasL、小膠質細胞、T細胞功能標誌物為卒中後患者腦功能評估指標，指導臨床靶向性治療和預後評估。
結題摘要
免疫和炎症反應在缺血性卒中病理過程中起著重要的作用。小膠質細胞是中樞神經系統中的第一道免疫防線，在缺血性卒中發揮雙重作用。缺血再灌注損傷後，外周T淋巴細胞大量浸潤至腦實質並作用於固有小膠質細胞，與腦免疫炎症的發生髮展及轉歸密切相關。我們之前的研究發現，下調FasL能抑制卒中後的免疫炎症及小膠質細胞與T細胞間相互作用，保護缺血性腦損傷，此作用不依賴Fas/FasL誘導的凋亡途徑。本課題基於前期工作基礎，採用FasL基因突變小鼠（Gld）製備體內腦缺血模型，利用多種分子生物學、病理學等技術研究Fas/FasL介導小膠質細胞與T細胞Crosstalk在缺血性免疫炎症中的重要作用，證實FasL作為一個關鍵因子參與卒中後免疫炎症的調節機制，並闡明機制。體內外研究發現，雙陰性T細胞分泌TNF-α促進M1型小膠質細胞極化，並且加劇缺血後神經元損傷。進一步通過對B6鼠和Gld鼠蛋白組學和分子實驗的研究證實，FasL/PTPN2/TNF-α信號通路在卒中後雙陰性T細胞的功能調控中起重要作用。我們對神經元可溶性FasL（sFasL）表達及其調節小膠質細胞極化的作用進行了研究，發現缺血性神經元可以釋放可溶性FasL，促進小膠質細胞向M1型極化，內在的機制與激活的JAK2/STAT3和NF-κB信號通路有關。CD4+ T細胞與小膠質細胞的相關研究發現，CD4+ T能通過NF-κB信號通路誘導小膠質細胞向M1型極化，但是FasL突變的CD4+ T明顯逆轉這一現象。此外，FasL突變還導致Th17/Treg細胞平衡向Treg傾斜，並且Gld來源的CD4+ T細胞與小膠質細胞共培的上清能降低缺氧後神經元損傷程度。此外，我們的研究還發現FasL突變能降低腦缺血後CD8+ T細胞毒性，從而減少CD8+ T誘導神經元死亡以及小膠質細胞向M1型轉化，其潛在的分子機制還需要進一步研究。臨床研究部分，我們對煙霧病並發缺血性卒中的患者進行了研究，結果提示與對照組相比，煙霧病卒中患者外周血sFasL明顯降低，Treg細胞增高，但是增加的Treg細胞對效應T細胞的免疫抑制功能減弱。通過以上一系列的研究，揭示了FasL在腦-免疫細胞網路中調控免疫細胞的功能，指導臨床靶向性治療和預後評估。
