《FMNL2/Shank2參與結直腸癌侵襲性偽足形成的分子機制》是依託深圳大學，由張小靜擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：FMNL2/Shank2參與結直腸癌侵襲性偽足形成的分子機制
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：張小靜
- 依託單位：深圳大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
FMNL2 是一個我們前期篩選並驗證的結直腸癌轉移促進基因。預實驗中，我們利用酵母雙雜交篩選出其相互作用蛋白Shank2，由於Shank2是Cortactin結合蛋白，而Cortactin是侵襲性偽足的關鍵標誌物，因此我們提出FMNL2依賴Shank2促進侵襲性偽足的形成，從而誘導結直腸癌的侵襲及轉移的新假設。本項目擬驗證這一機制，利用基因轉染、干擾、免疫螢光、明膠酶譜、活細胞成像技術、體內外侵襲及轉移實驗等進行（1）確認FMNL2通過Shank2活化Cortactin促進侵襲性偽足的形成；（2）檢測FMNL2介導的侵襲性偽足形成受EGF/cdc42信號通路的調控；（3）證實FMNL2依賴Shank2及侵襲性偽足誘導結直腸癌的侵襲及轉移。旨在揭示一個新的FMNL2表達調控機制，為臨床抗結直腸癌侵襲和轉移提供新的靶點和治療策略。
結題摘要
結直腸癌是常見的惡性腫瘤，已經成為我國三大癌症之一。三分之一的結直腸癌患者行手術和放化療後發生肝、肺轉移，危及生命。闡明結直腸癌轉移的分子機制，控制轉移是當前研究的重要方向。FMNL2 是一個我們前期篩選並驗證的結直腸癌轉移促進基因。我們利用酵母雙雜交篩選出其相互作用蛋白Shank2，由於Shank2是Cortactin結合蛋白，而Cortactin是侵襲性偽足的關鍵標誌物，因此我們提出FMNL2依賴Shank2促進侵襲性偽足的形成，從而誘導結直腸癌的侵襲及轉移的新理論。本項目利用基因轉染、干擾、免疫螢光、明膠酶譜、活細胞成像技術、體內外侵襲及轉移實驗等：（1）確認FMNL2通過Shank2活化Cortactin促進侵襲性偽足的形成；（2）檢測FMNL2介導的侵襲性偽足形成受EGF/cdc42信號通路的調控；（3）證實FMNL2依賴Shank2及侵襲性偽足誘導結直腸癌的侵襲及轉移。本項目的主要研究結果顯示：（1）FMNL2通過支架蛋白SHANK2與cortactin作用，還直接與cortactin相互作用； FMNL2與SHANK2、cortactin三色共定位於胞膜和胞漿；FMNL2與SHANK2的表達存在顯著正相關, FMNL2與cortactin的表達存在顯著正相關；人結腸癌組織中癌中表達FMNL2、SHANK2和cortactin,三者的表達趨勢較一致；（2）FMNL2-CT 段與 SHANK2 直接結合，FMNL2-FH1 與 cortactin-SH3 直接結合；（3）FMNL2促進人結直腸癌細胞侵襲性偽足的形成；（4）SHANK2和cortactin是FMNL2誘導侵襲性偽足形成所必需的；（5）hEGF/Cdc42信號通路在上游調控FMNL2誘導結直腸癌侵襲性偽足的形成；hEGF刺激後SiFMNL2/Cdc42Q61L細胞侵襲性偽足顯著增多；細胞遷移率顯著升高;給與AG1478抑制後FMNL2細胞侵襲性偽足顯著減少；明膠降解率顯著下降。本項目闡述了FMNL2與侵襲性偽足關鍵蛋白cortactin存在直接或間接作用，FMNL2通過SHANK2或cortactin促進結直腸癌細胞侵襲性偽足的形成，該作用受到上游hEGF/Cdc42信號通路的正向調節；為臨床抗結直腸癌侵襲和轉移提供新的靶點和治療策略。
