《EpoR乙醯化對胃癌的早期診斷及作用研究》是依託浙江大學，由胡偉玲擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：EpoR乙醯化對胃癌的早期診斷及作用研究
- 依託單位：浙江大學
- 項目負責人：胡偉玲
- 項目類別：青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
胃癌為世界上高發病率和高死亡率的腫瘤之一,胃黏膜腸化為主要的胃癌前病變。近期有文獻報導Epo/EpoR在胃癌組織中的表達高於胃正常組織。乙醯化修飾是細胞內蛋白翻譯後修飾的一種重要形式，在腫瘤的發生髮展有重要作用，其可能通過調控細胞的增殖、凋亡、遷移，從而促進腫瘤的生長和轉移。本研究預實驗提示EpoR能被乙醯化，胃腸化黏膜組織中EpoR表達水平較正常組織明顯增加。本項目欲用質譜分析測定早期胃癌和胃黏膜腸化中EpoR的乙醯化位點，製備特異性EpoR乙醯化抗體，深入研究EpoR乙醯化在不同級別的腸化黏膜組織中的表達水平及與早期胃癌的關係。並構建EpoR 質粒和突變質粒，利用腸化的原代細胞及胃癌細胞或正常細胞明確EpoR乙醯化對細胞增殖、凋亡、細胞遷移、浸潤等惡性生物學行為的影響，此研究結果將為我們進一步揭示胃癌形成的分子機理、尋找胃癌早期診斷、生物干預提供理論依據。
結題摘要
胃癌是最常見的惡性腫瘤之一，早期胃癌的生存率可達90%以上，而晚期的生存率只有10-20%。但患者在出現典型臨床症狀時，往往已經進入了晚期。雖然各個國家都投入了大量的經費對胃癌的早期診斷和治療都進行了研究，但目前尚無突破性的進展。 EPO-EPOR是新近研究的熱點，許多報導表明EPO-EPOR在各種腫瘤如乳腺癌、前列腺癌、子宮癌等20多種腫瘤細胞中均有表達，其與腫瘤的關係越來越密切，有望成為腫瘤治療中的新靶點。 蛋白質的翻譯後修飾對於調節生物功能有著非常重大的意義,乙醯化修飾是細胞內蛋白翻譯後修飾的一種重要形式。眾所周知,組蛋白的乙醯化和腫瘤的發生有密切關係。組蛋白的高乙醯化是轉錄活躍的一個標誌,而低乙醯化則與轉錄抑制有關。臨床研究證實,去乙醯化酶抑制劑(HDAC inhibitors), 如 SBHA,SAHA, MS-275, SNDX-275 等對於腫瘤有很好的治療效果。因此本研究欲進一步明確在胃癌中的EPOR的乙醯化水平及其與胃癌細胞增殖、存活等關係，為胃癌的診斷和治療提供新的線索。 本研究套用免疫組化和RT-PCR檢測正常胃黏膜、胃癌標本的EPO／EPOR的表達水平，EPOR乙醯化水平；套用western blot技術，檢測胃癌細胞株AGS，MKN45，SGC7901中EPOR和乙醯化的EPOR的表達水平，並觀察在EPO的作用下，EPOR乙醯化水平的變化，並檢測胃癌細胞中Epo刺激後引起的下游基因stat5a、 erk等磷酸化水平；構建EPOR質粒，用點突變構建KR突變體，用cck-8及克隆形成試驗檢測EPOR野生型及EPOR突變體對胃癌細胞增殖的影響，用Annexin V法檢測EPOR野生型及EPOR突變體對胃癌細胞凋亡的影響；經驗證，EPO/EPOR及其乙醯化水平在胃癌組織中的表達明顯高於正常組；在細胞水平上，胃癌細胞的EPO/EPOR及其乙醯化水平表達升高，且在EPO的刺激下，促進AGS細胞的生長，加快胃癌細胞的遷移並影響細胞的凋亡。因此，臨床應謹慎選擇 EPO 來改善腫瘤患者的貧血狀態。另外,由於 EPO/EPOR 對胃癌有促進生長以及預後差的作用,我們預期其可以作為治療中的靶向目標,抑制 EPOR 的表達,有可能促進腫瘤的逆轉,延緩生長,改善預後,提高患者生活質量,延長患者的生存期。
