《EphrinA4在氧誘導視網膜新生血管形成中的作用及機制研究》是依託北京大學，由黎曉新擔任負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：EphrinA4在氧誘導視網膜新生血管形成中的作用及機制研究
- 項目負責人：黎曉新
- 依託單位：北京大學
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
視網膜新生血管（Retinal neovascularization，RNV）常嚴重損害視力，是世界範圍最嚴重致盲性眼病之一,但目前還缺乏對其發病機制深入理解。多個研究提示，Eph-Ephrin系統在眼部新生血管性疾病包括視網膜新生血管中具有十分重要的作用，我們前期研究發現ephrinA4可能是一個參與RNV的關鍵基因。本研究將在小鼠視網膜新生血管模型及細胞缺氧模型中，研究ephrinA4在RNV中作用及相關的分子機制；並探索阻斷ephrinA4信號通路治療RNV的效果。希望通過對ephrinA4的研究，為深入認識視網膜新生血管的發生機制，尋找更加特異、有效的治療靶點提供理論和實驗證據。
結題摘要
研究背景：Eph-Ephrin系統在生理性和病理性血管形成中均發揮重要作用,但Ephrin-A4（Efna4）在視網膜新生血管（Retinal neovascularization，RNV）性疾病中的作用及其機制尚未闡明。本研究將探討Ephrin-A4在氧誘導視網膜病（oxygen-induced retinopathy，OIR）中的作用和分子機制。 方法：使用OIR小鼠模型和猴脈絡膜-視網膜血管內皮細胞（RF/6A）研究Ephrin-A4的表達模式和促新生血管功能。OIR小鼠玻璃體腔內注射小鼠Eprhin-A4特異性shRNA慢病毒(LV-shEfna4)，或RF/6A細胞轉導猴Ephrin-A4特異的shRNA（miEFNA4），通過視網膜鋪片和Matrigel體外成血管實驗，觀察阻斷Ephrin-A4抑制視網膜新生血管的效果。 結果：Ephrin-A4在OIR小鼠視網膜和低氧誘導的RF/6A 和RPE細胞中的表達均明顯上調。在體外實驗中，Ephrin-A4/Fc重組蛋白刺激，可以顯著增強RF/6A細胞的體外血管形成能力（P＜0.05），上調VEGFR2，Akt1和ERK1/2的磷酸化水平。沉默Ephrin-A4的表達後，RF/6A的增殖能力和體外成血管能力均顯著降低；並且，在Ephrin-A4缺失後的RF/6A細胞中，VEGF165刺激並不能上調VEGFR2，Akt1和ERK1/2的磷酸化水平，也不能增強RF/6A細胞的體外成血管能力。在體內實驗中，玻璃體腔注射LV-shEphrin-A4，抑制視網膜內Ephrin-A4的表達，可顯著地抑制OIR小鼠病理性RNV的形成和血管滲漏，減少無灌注區面積（P＜0.001），提示敲除ephrin-A4能夠抑制視網膜病理性RNV，但並不影響正常的視網膜血管再生。同時，沉默視網膜中的Ephrin-A4的表達後，視網膜中VEGFR2和ERK1/2的磷酸化水平顯著下調，但是Akt1的磷酸化水平沒有明顯改變。 結論：本研究發現，Ephrin-A4在RNV的形成中發揮重要作用，阻斷Ephrin-A4可以有效地抑制RNV的形成，但不影響視網膜生理性血管再生，提示Ephrin-A4是一個潛在的RNV治療靶點；Ephrin-A4主要通過調節VEGF信號傳導通路發揮作用，是VEGFR2磷酸化和激活其下游信號傳導通路必需的分子。
