《15-LOX在缺氧導致的視網膜新生血管疾病中的作用及其機制》是依託武漢大學，由賀濤擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：15-LOX在缺氧導致的視網膜新生血管疾病中的作用及其機制
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：賀濤
- 依託單位：武漢大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
缺氧導致的視網膜新生血管性疾病是眼科常見的致盲性眼病，目前臨床採用的雷射視網膜光凝等療效尚不滿意，缺乏有效的化學預防及治療方法，其發病的確切分子機制也知之甚少。花生四烯酸代謝在新生血管的形成過程中起到了重要的作用，其代謝涉及環氧合酶、脂氧合酶(LOX)以及細胞色素P450等三種酶的作用。在近年來人們逐漸認識到LOX在心血管及腫瘤血管生成中的重要作用，但其在視網膜疾病中的作用還尚未得到大家的關注。我們的前期研究已經在模擬人類早產兒你視網膜病變的小鼠氧誘導視網膜病變模型中證實視網膜新生血管形成涉及5-LOX的表達上調，而15-LOX則表現出抗新生血管生長的特性，本項目擬在體外及體內試驗中研究15-LOX對缺氧導致的視網膜新生血管形成的影響及其作用機制，探討將其作為治療視網膜新生血管性疾病靶點的可能性。
結題摘要
(一) 研究背景 缺氧導致的視網膜新生血管性疾病是眼科常見的致盲性眼病，目前臨床採用的雷射視網膜光凝等療效尚不滿意，缺乏有效的化學預防及治療方法，其發病的確切分子機制也知之甚少。花生四烯酸代謝在新生血管的形成過程中起到了重要的作用，其代謝涉及環氧合酶、脂氧合酶(LOX)以及細胞色素P450等三種酶的作用。在近年來人們逐漸認識到LOX在心血管及腫瘤血管生成中的重要作用，但其在視網膜疾病中的作用還尚未得到大家的關注。我們的前期研究已經在模擬人類早產兒視網膜病變的小鼠氧誘導視網膜病變模型中證實視網膜新生血管形成涉及15-LOX的表達上調，而15-LOX則表現出抗新生血管生長的特性，本項目擬在體外及體內試驗中研究15-LOX對缺氧導致的視網膜新生血管形成的影響及其作用機制，探討將其作為治療視網膜新生血管性疾病靶點的可能性。 (二) 研究內容 本研究分為體外細胞實驗和動物體內實驗兩部分。1.利用腺病毒將15-LOX-1轉染體外培養的視網膜微血管內皮細胞中，觀察轉染後其對微血管內皮細胞分泌血管生長相關因子、信號通路表達以及細胞周期和凋亡的影響2.將構建的重組腺病毒載體Ad/15-LOX-1注入OIR模型小鼠的玻璃體腔內以使其在視網膜組織中過表達，觀察其對OIR模型小鼠中視網膜新生血管生成的影響，並研究其可能的作用機制。 (三) 研究結果 在動物體內實驗中，15-LOX-1在正常對照組視網膜高表達，在OIR模型組低表達。而在玻璃體腔注射了Ad-15-LOX-1的小鼠中，轉染後的15-LOX-1主要高表達於視網膜的OPL,INL和GCL.且明顯可抑制視網膜新生血管的形成。其機制可能是通過上調PPAR-γ，下調VEGF-A和VEGFR-2發揮其抑制視網膜新生血管的作用。在體外實驗部分中，我們發現缺氧組的視網膜微血管內皮細胞的增殖能力明顯高於常氧組；而在缺氧組中，視網膜微血管內皮細胞的增殖能力隨缺氧時間的延長而增加，在48h增殖能力達到高峰，隨後下降。通過western blotting分析蛋白水平發現在缺氧環境下，視網膜微血管細胞可通過自分泌途徑上調血管內皮生長因子家族成員，完成自身增殖並生成視網膜新生血管。而15-LOX-1和PPAR-γ在視網膜血管形成中起負性調節作用。
