《CREB在缺氧誘導的視網膜新生血管性疾病中的作用及機制》是依託武漢大學，由邢怡橋擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：CREB在缺氧誘導的視網膜新生血管性疾病中的作用及機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：邢怡橋
- 依託單位：武漢大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
缺氧導致的視網膜新生血管性疾病是常見的致盲性眼病，包括糖尿病視網膜病變、視網膜靜脈阻塞以及早產兒視網膜病變等。臨床缺乏安全有效無損傷的治療方法，需要尋找既能抑制病理性新生血管形成，又有助於視網膜無灌注區的血管化，且能保護視網膜神經節細胞免受缺氧損害的理想治療靶點。cAMP應答元件結合蛋白（CREB）可以刺激基因轉錄，在生命活動的各個方面均起到了重要的作用。研究證實CREB可以促進血管生成，減少血管內皮滲漏，且可保護神經元細胞免受缺氧損害，理論上是治療缺氧導致的視網膜新生血管疾病的理想靶點。在前期工作中我們發現缺氧可以誘導視網膜微血管內皮細胞及視網膜組織過表達CREB，因此推斷CREB的高表達可能促進新生血管的形成，這有助於視網膜無灌注區的再血管化，但其是否也同時促進病理性新生血管的形成，是否能保護視網膜神經節細胞免受缺氧損害還不得而知，本項目擬深入探討CREB在此疾病過程中的作用及機制。
結題摘要
缺氧缺血導致的視網膜新生血管性疾病是十分常見的致盲性眼病，包括糖尿病性視網膜病變，視網膜靜脈阻塞以及早產兒視網膜病變等。目前臨床治療新生血管性疾病缺乏安全有效無損傷的治療方案，需要尋找既能抑制病理性新生血管形成，又能有助於視網膜無灌注區再血管化，且能保護視網膜神經節細胞免受缺氧損害的理想治療靶點。cMAP應答元件結合蛋白（CREB）可以刺激基因轉錄，在生命活動的各個方面均起到了重要的作用。研究證實CREB可以促進血管生成，減少血管內皮滲漏，且可保護神經元細胞免受缺氧損害，理論上是治療缺氧導致的視網膜新生血管疾病的理想靶點。在該項目的實驗中，我們研究了CREB在RMVECs細胞和OIR活體模型中的表達情況，並通過構建CREB siRNA病毒載體，成功抑制了CREB的表達。通過WB、流式細胞儀檢測，MTT細胞增殖實驗等方法，我們發現，CREB siRNA轉染體外實驗可以抑制缺氧誘導的RMVECs細胞的增殖；而在OIR小鼠模型中，通過視網膜冰凍切片技術、視網膜鋪片技術、玻璃體腔注射技術，HE染色新生血管細胞核計數等，我們證實CREB siRNA可以抑制低氧誘導的視網膜新生血管的形成，減少無灌注區的面積。通過WB和RT-PCR等分子生物學技術的研究，我們發現，CREB抑制RMVECs增殖和視網膜新生血管形成的主要機制可能是通過降低了Bcl-2的水平，同時提高了Caspase-3的水平，當然，降低了VEGF-A的水平也成為其中的關鍵因素。而CREB基因過表達的體外實驗證實，CREB的產生有助於神經節細胞的存活，對神經節細胞具有保護作用。通過WB和RT-PCR技術，我們發現BDNF/Bcl-2/PI3K通路參與了CREB對視神經節細胞的保護作用。綜上所述，我們認為，CREB在視網膜病理性新生血管形成中起到重要作用，因此，也可成為治療視網膜新生血管性疾病的重要靶點，本項目研究為新生血管性疾病的防治提供了依據和研究方向。
