Elek平板毒力試驗是一種體外的毒力測定方法。通過觀察白喉抗毒素與白喉外毒素的雙向瓊脂擴散現象,判斷所培養的白喉桿菌的產毒性。
基本介紹
- 中文名:Elek平板試驗
- 特點:白喉外毒素
- 材料:產毒素的白喉桿菌
- 方法:腖培養基10ml加熱融化
簡介,材料,方法,結果,
簡介
白喉桿菌的有毒菌株可產生白喉外毒素,白喉抗毒素可與其特異性結合,中和白喉外毒素的毒性,可用細菌培養法和動物試驗予以證實。
材料
1.產毒素的白喉桿菌、類白喉桿菌及待測的白喉桿菌呂氏血清斜面24h培養物。
2.Elek瓊脂蛋白腖培養基。
3.白喉抗毒素(1000u/m1)、馬或兔血清(無菌)、無菌濾紙條(6.0×1.5cm)、無菌5ml刻度吸管、無菌平皿及鑷子等。
方法
1.將Elek瓊脂蛋白腖培養基10ml加熱融化,待冷至50~55℃時,加入無菌的馬或兔血清2ml,立刻混勻,並傾注平板。
2.趁瓊脂未凝固前,用無菌鑷子將浸有白喉抗毒素(1000u/m1)的濾紙條(儘量使濾紙條上的抗毒素流盡)貼於平板中央,待瓊脂凝固後將平板置37℃溫箱內1~2h(平板面朝下),使培養基略乾燥。
3.如圖14-1所示接種細菌,以接種環取產毒素白喉桿菌、類白喉桿菌和待檢的白喉桿菌分別以與濾紙條成垂直的方向劃線接種,接種線須密且集中,接種的菌量宜多。若用此法測未知標本需設陽性對照(產毒株)及陰性對照(無毒株),一般每個平板可接種5~6個標本。置37℃培養24、48、72h觀察結果。
結果
注意觀察在接種線兩側距濾紙條約1cm處有無與接種線呈45°角的白色沉澱線出現。有沉澱者,白喉桿菌毒力試驗陽性,該菌株產生白喉外毒素;無沉澱線者,白喉桿菌毒力試驗陰性,該菌株不產生白喉外毒素。