基本介紹
- 中文名：EasySep
- EasySep：一款簡單、快捷
- 無需分離：的細胞分選平台
- 功能全面的：的EasySep
細胞分選,優點,步驟,經驗,
細胞分選
EasySep™是一款簡單、快捷，無一款簡單、快捷，無需分離柱的細胞分選平台需分離柱的細胞分選平台，能夠在短至25分鐘內分選出高純度細胞。 功能全面的EasySep™系統幾乎可以從任何樣本中實現對任何細胞類型的正選、負選或細胞去除。
優點
· 簡單快捷
無需分離柱或洗脫即可分離細胞。
· 高細胞純度和高回收率
純度高達99%。
· 兼容流式細胞分析
EasySep™磁珠不干擾FACS分析或其他下游套用。
磁極步驟
本操作說明是為配合EasySep磁極（18000）使用而設計的。如果使用EasySep大磁極（18001）。
1. 準備濃度為5×107細胞/ml的培養液培養的單核細胞懸液。置於一個12×75mm聚苯乙烯試管。每試管不要超過2ml（即1×108細胞）。
* 推薦使用FalconTM 5ml的圓底聚苯乙烯管（Becton Dickinson,貨號#352058）
2. 按50ul抗體/ml細胞懸液的比例，加入EasySep負選人造血祖細胞抗體混合物（例如：1ml細胞懸液加入50ul抗體混合物）。混勻，室溫孵育15分鐘。
3. 加入EasySep 磁微粒，用移液器上下吹打五次以上，使之充分混勻。避免使用渦旋震盪器。磁微粒加入量為50ul/ml（例如：1ml細胞懸液加入50ul磁微粒）。混勻，室溫孵育15分鐘。
注意：試劑盒提供過量的磁微粒，抗體混合液用完後可將其丟棄。
4. 把細胞培養液補充體積到2.5ml。用移液管在試管中輕輕上下吹打2～3次使細胞混勻。將試管（無蓋）置於磁極中。靜置10分鐘。
5. 將磁極連試管一起拿起，連續緩慢傾倒磁極盒試管，將需要的未吸附細胞轉移至另一個新的12×75mm的聚苯乙烯管中。標記了磁微粒的非目標細胞由於磁極的磁場的吸引，仍然留在原來的管子中。保持磁極與試管倒置狀態2-3秒，然後使試管口恢復向上的位置。
* 不要搖晃或者擦拭粘在試管口的液滴。
6. 從EasySep磁極中取出裝有非目的細胞的試管，並將含有目的細胞的新試管置於磁極中，準備下一輪的磁微粒分離。
經驗
從20ml血中可分出單核細胞數目為：2.5×107/ml，需加入抗體和磁珠各25ul。
