EGFR抑制劑誘導肺癌細胞保護性自噬及機制研究

《EGFR抑制劑誘導肺癌細胞保護性自噬及機制研究》是依託浙江大學，由潘宏銘擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：EGFR抑制劑誘導肺癌細胞保護性自噬及機制研究
• 依託單位：浙江大學
• 項目負責人：潘宏銘
• 項目類別：面上項目

項目摘要

EGFR抑制劑已發展為治療非小細胞肺癌的重要藥物，但患者易出現對該類靶向藥物耐藥，對其耐藥性研究廣泛，目前尚無自噬參與調控肺癌靶向治療敏感性的報導。我們前期研究發現，EGFR抑制劑在誘導肺癌細胞凋亡的同時，激活了自噬，抑制自噬可以增加肺癌對EGFR抑制劑的敏感性。本課題套用電鏡、免疫印跡及雷射共聚焦顯微鏡等方法從形態及分子水平驗證吉非替尼與埃羅替尼可以誘導多種肺癌細胞自噬；用小分子抑制劑及RNA干擾的方法阻斷肺癌細胞自噬，在細胞及動物模型上研究抑制自噬對於EGFR抑制劑治療效果的影響；用免疫印跡、免疫共沉澱等分子生物學方法研究EGFR抑制劑誘導肺癌細胞自噬的具體分子機理；運用高通量技術分析預測抑制自噬增敏EGFR抑制劑的可能關鍵因子，並進一步在細胞模型及臨床樣本上驗證。通過本研究可以證實聯合套用自噬抑制劑及EGFR抑制劑可以更加有效地治療非小細胞肺癌。

結題摘要

表皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑（EGFR-TKI）及克唑替尼已成為治療具有相應敏感突變非小細胞肺癌的首選藥物，但患者最終都出現了對靶向藥物的繼發耐藥，甚至有小部分患者一開始就具有原發耐藥性。對其耐藥性研究廣泛，但分子機制仍未完全清晰。本課題研究發現反饋性自噬及STAT3的激活參與調控肺癌靶向治療的耐藥。 本研究從形態學及分子生物學水平在多種肺癌細胞繫上證實EGFR-TKI吉非替尼和厄洛替尼可以激活腫瘤細胞自噬；並在細胞及肺癌小鼠荷瘤模型上證實，抑制自噬可以增加EGFR-TKI的敏感性；分子機制研究發現EGFR-TKI主要通過抑制PI3K-AKT-mTOR信號通路誘導自噬；此外，EGFR-TKI還可以反饋性地激活STAT3，導致其繼發及原發耐藥，而不同細胞器定位的STAT3可以從多種水平調控自噬過程；環孢黴素A（CsA）可以通過抑制STAT3在細胞及動物水平增加吉非替尼對多種耐藥肺癌細胞的治療效果。 本研究還通過電鏡、螢光免疫組化等方法證實c-MET的靶向藥物克唑替尼也可以誘導多種肺癌細胞自噬；抑制自噬可以在細胞及荷瘤鼠水平增加腫瘤細胞對克唑替尼的敏感性；機制研究發現克唑替尼誘導肺癌細胞自噬主要是通過分階段的抑制胞質及胞核中的STAT3實現，胞質中STAT3的抑制導致EIF2AK2與其解離，繼而磷酸化EIF2A而誘導自噬增加，而胞核中STAT3的抑制導致其轉錄激活的BCL2水平下降，進而促進自噬水平的持續增加。 本課題的研究結果證實反饋性地激活自噬及STAT3可能是肺癌靶向治療原發及繼發耐藥的重要機制。聯合運用自噬抑制劑或者STAT3抑制劑可以在細胞及動物水平提高肺癌靶向治療的療效。為進一步開展相應的臨床研究提供了理論和前期動物實驗依據。