《E3泛素連線酶TRIP負向調控TLR介導的炎症反應及分子機制研究》是依託山東大學，由張猛擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：E3泛素連線酶TRIP負向調控TLR介導的炎症反應及分子機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：張猛
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
固有免疫細胞表面的TLR會識別細菌的脂多糖（LPS）等，活化NF-kB並產生大量炎症因子，而對該信號通路調控機制的研究並不完善。我們前期研究發現，LPS刺激巨噬細胞後，E3連線酶TRIP的表達量明顯增加，對TRIP特異性的干擾可顯著增強LPS誘導的TNF-α、IL-6的表達，進一步研究顯示，TRIP可與磷酸激酶TAK1發生結合，並促進其降解。我們提出假設，TRIP可能會作為E3泛素連線酶將TAK1進行K48位泛素化並使其降解，進而負向調控TLR4介導的炎症反應。本研究利用內毒素休克模型和RT-PCR、報告基因、免疫共沉澱、體外泛素化等分子技術手段證明這一假說。本研究旨在闡明TRIP調節TLR4介導的炎症反應的分子機制，為TLR4信號轉導機制提供新的認識；探討TRIP可否作為反饋信號調節TNF-α、IL-6的產生，為尋找基因轉染防治細菌感染及內毒素休克等疾病提供理論基礎。
結題摘要
固有免疫是機體抵抗病原微生物感染的第一道防線，天然免疫細胞感知外界病原微生物後，活化NF-kB並產生大量炎症因子，如TNF-α、IL-6等，而對該信號通路調控機制的研究並不完善。在國家自然基金資助下，我們利用內毒素休克模型和RT-PCR、報告基因、免疫共沉澱、體外泛素化等分子技術手段，系統的研究TRIP調控天然免疫的作用機制。1、發現LPS刺激巨噬細胞後，E3連線酶TRIP的表達量明顯增加，出核入核情況未發生變化； 2、干擾掉TRIP後，LPS誘導的TNF-α、IL-6的表達明顯上調，NF-KB磷酸化水平也顯著升高; 3、LPS刺激巨噬細胞後，TRIP會與磷酸激酶TAK1發生結合，且具有明顯時間梯度；4、體內及體外實驗證明，TRIP作為E3泛素連線酶將TAK1進行K48位泛素化及使其降解，進而負向調控TLR4介導的炎症反應。本研究闡明了TRIP調節TLR4介導的炎症反應的分子機制，為TLR4信號轉導機制提供新的認識，目前仍有部分結果正在整理投稿中。課題執行期間，作為通訊作者或者主要完成人身份共發表SCI論文9篇（標註課題號的SCI論文3篇），其中影響影響因子大於20的1篇、大於10的2篇。課題負責人獲得國家自然基金面上項目1項；項目負責人作為第一作者發表在Nat Immunol上的論文入選F1000 Prime.
