DNA序列分析

DNA序列分析是進行基因的精細結構和功能分析、繪製基因圖譜、轉基因檢測的重要手段。DNA序列測定主要是在DNA內切酶、合成酶的套用，高解析度聚丙烯醯胺變性凝膠電泳技術等基礎上建立起來的。目前用於測序分析的方法有Sanger（1977）的雙脫氧鏈末端終止法和Maxam與Gilbert（1977）的化學降解法兩種。

雙脫氧鏈末端終止法的巧妙之處在於引入了雙脫氧核苷三磷酸（dlNTP)作為鏈合成的終止劑，結果獲得一系列有相同起點端而終止端在長度上相差僅一個核苷酸的以A、T.G.C為結尾的四組由所有可能長度核苷酸片段組成的DNA片段群，通過聚丙烯醯胺凝膠變性電泳，將以上在長度上差一個核苷酸的DNA片段群相互分開，最後通過放射自顯影將經變性電冰分開的DNA片段進行顯色和分析。目前採用毛細管電冰技術，套用四色螢光染料標記ddNTP，採用基因分析儀（即DNA測序儀）已可對序列測定自動化，分析結果能以凝膠電冰圖譜、螢光吸收峰圖或鹼基排列順序等多種形式輸出。DNA序列分析常用於分析未知或已知的基因突變。