DNA分型技術是通過分子基因分型比較鑑定生物個體的一種DNA分析技術。用以進行比較的生物樣品的DNA通過限制性核酸內切酶酶切、電泳分離和同位素標記的重複DNA雜交，可以提供對於每個個體特異的放射自顯影帶型。
基本介紹
- 中文名：DNA分型技術
- 涉及學科：生物、化學
- 相關技術：限制酶酶切、電泳分離、DNA雜交
- 套用領域：親子鑑定、法醫鑑定
技術介紹,工作原理,技術套用,法醫學套用,發展歷程,
技術介紹
DNA分型技術是通過分子基因分型比較鑑定生物個體的一種DNA分析技術。用以進行比較的生物樣品的DNA通過限制性核酸內切酶酶切、電泳分離和同位素標記的重複DNA雜交，可以提供對於每個個體特異的放射自顯影帶型。
工作原理
1.將送檢的各種生物學檢樣，如毛髮、血痕、精斑、人體組織或白骨等，把其中所含的DNA 提取出來。
2.選用與探針配對的限制性核酸內切酶，在長鏈DNA 位置上加以切割，將相對分子質量很大的DNA 長鏈切短成許多長度不同的小片段。
3.在膠板尺寸較長的凝膠電泳儀中，對完全酶解後的DNA 片段進行電泳，各酶切片段就會按其長度大小在電場中進行分離。
4.先用鹼性溶液使凝膠板中分離開的雙鏈DNA 片段變性為單鏈片段，然後將凝膠板夾在尼龍膜中，使這些單鏈DNA 片段印潰、轉移並永久性地固定在尼龍膜上。
5.讓放射性DNA探針與尼龍膜上的單鏈DNA片段進行分子雜交。
6.用放射性膠片與尼龍薄膜疊放，尼龍膜上的放射性探針便會發出X 射線使膠片曝光，從而使雜交有探針的長度不同的DNA片段位置顯影在膠片上。這樣的特徵 DNA片段條狀圖譜，便是所謂的DNA指紋。
技術套用
20世紀80年代中期，DNA分型技術開始套用於法醫鑑定，一滴血，一抹唾液，一根毛髮，只要是人體細胞，都可用於DNA分析、鑑定。1985年首次套用DNA分型技術，對一起英國移民糾紛案成功地進行了親子鑑定，並於1986年又首次用於一起強姦殺人的刑事案件中，從數千人中查找並認定犯罪嫌疑人。DNA分型技術從此發生了一次質的飛躍。
隨著DNA檢驗技術的發展，它在法醫工作中的套用越來越廣泛。從親子鑑定到同一認定，這一技術不斷為公安偵查和法庭審判工作提供可靠的證據，伴隨著該項技術的不斷完善及其標準化程度的提高，DNA分型技術在偵查破案中已得到了廣泛的套用。
法醫學套用
刑事偵查
DNA分型技術一種新的偵查手段，在偵查的舊技術時代，不完整或不清晰的指紋無法分辨指紋所有者的確切身份而失去作用，而通過DNA分型技術則可以通過分析指紋所留的油脂，汗液，皮屑等物的DNA以確定指紋所有者的確切身份，從而幫助分析案情。
親子鑑定
自從傑弗里斯等人於1985年首次對一起移民糾紛中的母子關係作出肯定鑑定以來，用DNA 指紋術進行親子鑑定已有20多年的歷史了。代表性的報導有：在一起無名屍的鑑定過程中，專家們將提取到的腐屍殘血中的DNA，和假定受害人雙親的DNA進行DNA指紋鑑定後，成功地對這具無名屍的人身作出了鑑定。在常規血清學檢驗不能對親子關係作出肯定結論的情況下，採用DNA 指紋術便可輕易地作出結論。
事故受難者殘骸鑑定
在空難、火災、地震等災難事故中，單純依靠法醫學和常規法血清學檢驗，是很難對所有遇難人員的殘骸加以區分的。因此，在常規手段行不通時，採用DNA 指紋技術已成為最佳選擇。
人種、性別鑑定
研究表明，DNA 指紋術可在相當大程度上用於人種鑑定，並測出白種人和非洲黑人的DNA多態片段及它在特定範圍內的出現頻率，具有種屬代表性。有人對長達20年的陳舊血跡中的降解DNA進行了性別鑑定，並在人、獸的區分鑑定中取得成功。
發展歷程
我國法醫DNA技術的發展道路不是很長，但卻取得了突出的成果，在偵查破案中發揮了巨大的作用。
在“七五”後期，從1987年起，我國正式立項對DNA指紋技術進行研究，經過兩年的努力，至1989年我國首次把DNA指紋技術套用於辦案，開始了我國 法醫DNA檢驗的新時代。隨著DNA指紋技術的不斷套用，技術人員越來越感到其不能滿足實際工作的需要，存在許多不足之處。
“八五”期間，我國把解決法醫DNA檢驗存在的疑難問題的研究列入重點攻關計畫。在DNA指紋技術的研究中裝備了國產化的多位點探針，建立了用非同位素標 記探針的方法檢測DNA指紋技術;在利用PCR技術進行DNA檢驗的研究中建立了檢測DNA擴增片段長度多態性的方法，用於一系列多態性位點的分析;在解 決毛髮、指甲等特殊檢材的檢驗上，建立了測定人類線粒體DNA序列多態性的方法。所有這些成果，擴大了DNA技術檢驗各種檢材的能力，更加適合於實際檢材 的需要，尤其是PCR檢驗方法的建立，使得DNA技術更有生命力，適合於推廣套用。
進入“九五”期間，我國法醫DNA檢驗技術又有了新的發展，除了對一些疑難檢材如骨骼等的檢驗進行研究外，商品化DNA檢驗試劑盒的出現，使DNA檢驗技 術更加規範和標準化，尤其是STR複合擴增技術的套用使DNA檢驗技術步入了新的階段。在檢測方法上，也從銀染法人工染色、肉眼觀察分析結果發展到螢光法 自動電泳收集、計算機分析結果，一次檢驗分析的STR多態性位點顯著增多，最多的一次檢驗可達16個位點，大大提高了個體識別率，達到了同一認定的水平。
經過十餘年的刻苦攻關，法醫DNA檢驗技術取得了豐碩的成果，DNA指紋技術正日趨被淘汰。隨著PCR多態性系統的大量增多，基於PCR方法進行的檢驗在個體識別率上顯著提高，在我國使用DNA指紋進行辦案的實驗室也大大減少，該方法在案件鑑定中已基本被淘汰。
STR是存在於人類基因組DNA中的一類具有長度多態性的DNA序列，其核心序列一般由2～6個鹼基構成，不同數目的核心序列呈串聯重複排列，而呈現出長 度多態性。一般認為，人類基因組DNA中平均每6～10kb就有一個STR位點，其多態性成為法醫物證檢驗個人識別和親子鑑定的豐富來源。與DNA指紋技 術相比，基於PCR技術的STR多態性分型在操作上要簡便得多，在靈敏度上要高得多，在檢驗降解DNA的能力上要強得多，在結果分析上要標準得多。同時， 由於STR的擴增片段較短、擴增條件類似，能夠在同一體系中進行複合擴增，一次檢驗就獲得較多的多態性信息。分析STR位點的多態性是法醫DNA檢驗技術 的新突破，己成為法醫學上個體識別和親子鑑定主要技術方法。
在檢測方法上，國內根據各自實驗室情況的不同，分別採用銀染法和螢光法進行STR的分型。近兩年來，螢光法檢測技術以其快速(一次檢驗僅需數小時)、 靈敏度高(適合現場提取的微量樣品的檢驗)、檢驗結果更加準確(每個泳道內都加入內標)、易於標準化和建立資料庫等優點逐漸代替了銀染法檢測技術，但是使 用螢光自動分析方法對STR位點分型又有所需儀器設備以及所用消耗試劑昂貴的缺陷。
