《DHX32在結腸癌5-FU耐藥中的作用及機制》是依託中山大學，由林華月擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：DHX32在結腸癌5-FU耐藥中的作用及機制
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：林華月
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
5-氟尿嘧啶（5-FU）是目前腸道腫瘤的首選化療藥物，但是許多患者對以5-FU為主的化療產生耐藥，嚴重影響了結腸癌的治療和預後。DHX32是一種新型的RNA螺旋酶，該蛋白在結腸癌中的功能尚未有文章報導。前期工作表明在結腸癌細胞中干擾DHX32表達能夠明顯地抑制細胞增殖並促進5-FU誘導的細胞凋亡，提高結腸癌細胞對5-FU的敏感性；信號通路分析顯示DHX32對AKT的磷酸化起正調控作用。因此，我們提出DHX32通過PI3K/AKT信號通路影響結腸癌對5-FU耐藥的假設。本項目擬進一步研究DHX32對PI3K/AKT通路的調控方式以及介導5-FU耐藥的下游凋亡信號，並從組織水平和動物模型對上述機制進行驗證。對DHX32調控結腸癌細胞增殖和凋亡的研究有助於探索結腸癌發生髮展的分子機理，探討DHX32與5-FU療效的相關性及抵抗耐藥的機制將有望為結腸癌的臨床治療提供新的靶點和思路。
結題摘要
結腸癌是常見的惡性腫瘤之一，近年來結腸癌的發病率在我國呈現逐年上升的趨勢。化療是結腸癌臨床治療最主要的手段之一，其中5-FU是目前腸道惡性腫瘤的首選化療藥物。但是許多患者對以5-FU為主的化療產生耐藥，嚴重影響了結腸癌的治療和預後。結腸癌患者對5-FU耐藥的機制較為複雜，是一個多基因參與的過程。對這些基因的研究是目前癌症研究的熱點，對於探討結腸癌的發病機制和治療抵抗具有重要的意義。DHX32是近年來新發現的一種RNA螺旋酶，本項目組在前期篩選結腸癌的差異表達基因時發現DHX32基因在結腸癌組織中表達上調。本項目中我們也發現了DHX32的蛋白水平在結腸癌病人組織中出現明顯上調，並且與結腸癌的分化程度相關。細胞水平的功能實驗結果表明，DHX32能促進結腸癌細胞增殖、遷移和侵襲，抑制5-FU誘導的細胞凋亡。qPCR晶片的篩選結果顯示，敲低DHX32抑制了血管生成因子VEGFA的mRNA水平，預示著DHX32可能參與了腫瘤血管生成的調控。本項目研究發現，在結腸癌細胞中DHX32能激活Akt，並且通過與Akt下游beta-catenin結合穩定其蛋白水平從而上調beta-catenin下游靶基因VEGFA的轉錄；由此提高了腫瘤微環境中VEGFA的蛋白水平，促進了血管內皮細胞的募集和腫瘤細胞的血管生成，由此導致了對5-FU的耐藥。裸鼠移植瘤實驗結果表明，敲低DHX32能顯著降低結腸癌細胞裸鼠移植瘤的血管密度並抑制裸鼠移植瘤成瘤；在結腸癌裸鼠移植瘤中注射5-FU能減小移植瘤大小，而同時注射靶向DHX32的siRNA核酸藥物能進一步提高5-FU的療效。結腸癌病人組織水平的研究也驗證了結腸癌組織中DHX32與beta-catenin的蛋白表達水平及腫瘤血管密度呈正相關，並且癌組織中DHX32的高表達提示了結腸癌病人的不良預後。本項目的研究明確了DHX32促進結腸癌發生髮展的功能，探索了DHX32在結腸癌中發揮調控作用的分子機制，並在動物模型中初步探討了以DHX32作為靶點的RNA核酸干擾藥物的療效。為臨床研究結腸癌的發病機理及發現相關的診斷和治療靶點提供了潛在的生物標誌物，為以DHX32為靶點的藥物開發提供了理論和實驗基礎，具有重要的科學研究意義及潛在的臨床套用價值。
