基本介紹
- 中文名：CXXC4-AMOTL2-YAP軸在調控胃癌細胞凋亡中的作用及分子機制研究
- 依託單位：浙江大學
- 項目負責人：陸海琦
- 項目類別：青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
胃癌等腫瘤中存在Hippo-YAP等信號通路的異常。這些通路的異常既可以是遺傳學變化的結果，也可能是表觀遺傳紊亂導致的相關調控蛋白表達異常。Hippo-YAP信號通路通過調控細胞凋亡等過程與腫瘤發生髮展密切相關，但在胃癌中的調控機制尚未明確。我們在前期研究中發現新抑癌基因CXXC4因表觀遺傳變化在胃癌中表達下調；CXXC4可誘導胃癌細胞凋亡，但具體機制未明；CXXC4可抑制YAP表達及YAP下游靶基因如survivin的轉錄；CXXC4定位於細胞核，且可能是一個新的轉錄因子；CXXC4可直接結合YAP負調控因子AMOTL2基因並促進其轉錄表達。因此，CXXC4可能通過直接調控AMOTL2轉錄來抑制YAP活性，從而促進細胞凋亡並抑制胃癌發生髮展。本項目擬通過分析CXXC4誘導細胞凋亡的機制以及對AMOTL2轉錄調控的分子機制驗證該假說，從而明確胃癌發病機制，為胃癌的臨床防治提供新的理論基礎。
結題摘要
胃癌等腫瘤中存在Hippo-YAP等信號通路的異常。這些通路的異常既可以是遺傳學變化的結果，也可能是表觀遺傳紊亂導致的相關調控蛋白表達異常。Hippo-YAP信號通路通過調控細胞凋亡等過程與腫瘤發生髮展密切相關，但在胃癌中的調控機制尚未明確。我們在前期研究中發現新抑癌基因CXXC4因表觀遺傳變化在胃癌中表達下調；CXXC4可誘導胃癌細胞凋亡，但具體機制未明；CXXC4可抑制YAP表達及YAP下游靶基因如survivin的轉錄；CXXC4定位於細胞核，且可能是一個新的轉錄因子；CXXC4可直接結合YAP負調控因子AMOTL2基因並促進其轉錄表達。因此，我們提出假說：CXXC4可能通過直接調控AMOTL2轉錄來抑制YAP活性，從而促進細胞凋亡並抑制胃癌發生髮展。但在後期實驗中我們發現在Dox誘導CXXC4表達的SGC7901-WT細胞中YAP的蛋白表達不穩定，多次重複後仍不能確定YAP的表達變化，無法確定CXXC4是否真正通過調控Hippo-YAP信號通路導致細胞凋亡的機制。因此我們重新分析基因晶片篩選結果後篩選出CXXC4下游一個潛在靶基因GDF15，並在mRNA和蛋白水平均證實GDF15確實是CXXC4下游的一個靶基因，CXXC4是通過促進GDF15的轉錄進而發揮促進凋亡的作用。我們進一步研究發現，轉錄因子特殊蛋白1（Sp1）可以直接結合到GDF15的啟動子區域，並通過Western blot和染色質免疫共沉澱實驗證實CXXC4誘導GDF15的轉錄調控是通過增強Sp1對於GDF15的結合能力來實現的。因此，本項目通過分析CXXC4誘導細胞凋亡的機制以及CXXC4對GDF15轉錄調控的分子機制，為明確胃癌發病機制及胃癌的臨床防治提供新的理論基礎。
