《CTLA-4通過Foxp3+調節性T細胞調控結核發病的機制研究》是依託復旦大學，由邵凌雲擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：CTLA-4通過Foxp3+調節性T細胞調控結核發病的機制研究
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：邵凌雲
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
在小鼠、靈長類動物及肺結核患者中的研究均提示Foxp3+ 調節性T細胞（Treg）在結核的免疫發病機制中起著重要作用。新近研究證實，細胞毒性T淋巴細胞相關抗原4（CTLA-4）是Foxp3+ Treg細胞免疫功能的主要調控因子。因此，我們推測CTLA-4在Foxp3+ Treg細胞調控結核發病中起著關鍵作用。本課題擬採用病例對照研究，在活動性肺結核患者和潛伏性結核感染（LTBI）者中，檢測外周和/或肺組織淋巴細胞（包括Treg細胞）CTLA-4的表達；同時利用體外模型，以磁珠分選、T細胞增殖、CTLA-4單克隆抗體封閉實驗及Real-time PCR技術等對CTLA-4調控結核特異性Foxp3+ Treg細胞功能的機制進行研究。本課題的研究結果將初步闡明CTLA-4通過Foxp3+ Treg細胞調控結核發病的免疫機制，為開發以CTLA-4為靶位的新型抗結核免疫治療方法奠定基礎。
結題摘要
小鼠研究證實，細胞毒性T淋巴細胞相關抗原4（CTLA-4）是參與控制Foxp3+ Treg細胞免疫調節功能的重要分子。而CTLA-4在感染性疾病中的研究十分有限。因此，為探索結核感染過程中，CTLA-4在Foxp3+ Treg細胞免疫調節機制中的作用，本課題進行了病例對照研究和小鼠模型研究。病例對照研究中，共入選研究對象136例，包括活動性結核（ATB）患者87例（其中活動性肺結核68例，結核性胸膜炎19例）、潛伏性結核感染（LTBI）者16例和健康對照（HC）者33例。結果發現，ATB患者中，Foxp3+ Treg細胞數量（5.91±1.86%）顯著高於LTBI者（4.34±1.16%）和HC（4.62±1.43%）（分別為P=0.012和P=0.0008），而且Foxp3+ Treg細胞的CTLA-4表達量（22.85±10.90%）顯著高於LTBI（6.99±2.51%）和HC（9.54±4.48%）（均為P＜0.0001）。此外，體外研究顯示，在PPD抗原刺激下，Treg可以顯著抑制Tresp細胞分泌IFN-γ 及Tresp細胞的增殖（分別為P=0.0004和P=0.043）。而在上述培養體系中，同時加入CTLA-4阻斷劑，那么Tresp細胞分泌IFN-γ及細胞增殖的能力得到明顯恢復 （分別為P=0.0003和P=0.048）；這說明加入CTLA-4阻斷劑可以去除Treg細胞的抑制功能。進一步研究證實，Tresp細胞分泌IFN-γ和IL-2的mRNA表達量同樣受Treg細胞抑制，而在加入CTLA-4阻斷劑後明顯上調；但IL-10和TGF-β水平在不同細胞培養體系中無顯著變化。在小鼠模型研究中，利用C57BL/6小鼠，在BSL3級實驗室建立結核分枝桿菌感染模型，然後根據給藥情況分為4組，包括未治療組、CTLA-4阻斷劑組、IgG同型對照組和INH治療組，每組2隻。小鼠肺和脾組織的結核分枝桿菌菌落形成單位（CFU）計數結果顯示，CTLA-4阻斷劑組均較IgG同型對照組降低2log左右，這表明通過阻斷CTLA-4增強T細胞免疫可明顯提高機體對結核桿菌的清除能力。因此，CTLA-4在Foxp3+ Treg細胞調控結核發病中起著至關重要的作用，以CTLA-4為靶位進行免疫調控很有可能成為一種極具套用前景的新型抗結核免疫治療方法。
