《CSCs的分離、識別及其分子遺傳特徵研究年度報告》是向榮於2013年12月20日編制的科技報告。
基本介紹
- 中文名：CSCs的分離、識別及其分子遺傳特徵研究年度報告
- 作者： 向榮
- 編制時間：2013年12月20日
- 報告類型：進展報告
內容摘要
本研究針對CSCs乾性的維持和調節這一關鍵科學問題，以乳腺癌等惡性實體腫瘤為研究對象，篩選CSCs的新標誌物，尋找對CSCs乾性調節發揮主要作用的關鍵蛋白，揭示CSCs乾性調節作用網路以及關鍵蛋白靶點，闡明CSCs的惡性轉化路徑，以期發掘得到針對CSCs治療的新靶點。本研究實施的第一年的主要進展如下： 轉錄因子SOX2與腫瘤細胞抗凋亡特性以及腫瘤轉移密切相關。本年度的研究發現SOX2在肺癌幹細胞群中高表達，SOX2通過調控MAP4K4-Survivin信號通路維持腫瘤細胞抗凋亡特性，通過基因晶片分析我們發現沉默SOX2可調控246個癌基因的表達發生變化，揭示了SOX2在肺癌發生中的潛在分子機制。並且，SOX2通過WNT1/?-Catenin信號途徑，增強腫瘤細胞對微環境中TGF-1刺激的敏感性調節腫瘤細胞的EMT過程，通過抑制E-cadherin的表達從而促進腫瘤細胞的轉移。以上結果表明，SOX2在腫瘤細胞抗凋亡和腫瘤轉移中發揮了重要的作用，是一種重要的乾性調節分子。 ATOH8對乳腺癌細胞乾性維持的作用。首先，我們發現轉錄因子ATOH8可以調控OCT4和NANOG的表達，且其表達水平與乳腺癌病人預後顯著相關，提示ATOH8參與了對CSCs乾性的調節。接下來，我們分別在人和小鼠乳腺癌細胞系中構建了沉默ATOH8的細胞系，發現沉默ATOH8以後，幹細胞因子OCT4和NANOG的表達水平下調，側群細胞和ALDH1+細胞比例顯著下降，細胞成球能力明顯降低；並且沉默ATOH8的乳腺癌細胞系成瘤能力明顯減低。上述結果都提示ATOH8對於乳腺癌細胞乾性的維持發揮了重要作用；接下來，我們將詳細闡明ATOH8對乳腺癌細胞乾性的調節機制。 透明質酸受體（CD44）和透明質酸合成酶2（HAS2）對乳腺癌細胞乾性維持的作用。CD44是多種實體瘤幹細胞的表面標誌物，而其也是細胞外基質透明質酸（HA）的受體。我們分別構建了CD44低表達和HAS2低表達的乳腺癌細胞系，發現低表達HAS2後，CD44highCD24low的細胞比例減少，幹細胞相關因子（Sox2, Oct4, Nanog）的表達降低，細胞成球能力降低；低表達CD44後，幹細胞相關因子Sox2和 Oct4的表達升高，Nanog的表達降低，細胞在軟瓊脂上形成集落的能力增強。這些結果初步提示CD44和HAS2參與維持腫瘤幹細胞的乾性。 利用Hoechst 33342染色與高通量FACS結合的方法篩選特異性殺傷CSCs的藥物。我們將Hoechst 33342染色與高通量FACS進行了有機的結合，分別對FDA已批准的4677種小分子抑制劑以及第4研究組提供的126種新合成的小分子抑制劑進行了篩選，驗證了此方法的可行性，並將利用得到的候選分子進行下一步的研究。
