CRT/gC1qR複合體在氧化應激介導黑素細胞破壞中的機制研究

《CRT/gC1qR複合體在氧化應激介導黑素細胞破壞中的機制研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由劉玲擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：CRT/gC1qR複合體在氧化應激介導黑素細胞破壞中的機制研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：劉玲
• 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學

項目摘要

黑素細胞破壞或凋亡導致白癜風發病的機制是皮膚科研究熱點之一。前期課題組研究證實：H2O2誘導氧化應激時，黑素細胞中的鈣網織蛋白（CRT）翻轉至細胞膜表面，誘導免疫原性增強，促進炎症因子表達，激活後續免疫應答，進一步對黑素細胞產生攻擊。CRT又稱cC1qR，是補體C1q的主要受體之一，C1q另一受體gC1qR可調控細胞凋亡，而CRT/gC1qR複合體在持續氧化應激誘導細胞損傷中的作用尚不明確。為探討CRT/gC1qR複合體在氧化應激誘導白癜風發病中的機制，擬構建白癜風三維表皮模型及白癜風小鼠模型，深入研究CRT、gC1qR在角質形成細胞和黑素細胞中的表達模式及重要功能，明確CRT、gC1qR、CRT/gC1qR複合體在表皮細胞應對氧化損傷中的重要作用，有助於闡明氧化應與異常免疫應答的橋樑機制，為研究白癜風發病機制、指導疾病防治提供重要依據。

結題摘要

氧化應激直接導致黑素細胞損傷或凋亡並啟動異常免疫應答，是尋常型白癜風發病的重要機制。鈣網織蛋白（CRT）又稱cC1qR，是補體C1q的主要受體之一，而C1q的另一受體gC1qR表達於除紅細胞外的幾乎所有哺乳動物細胞，在炎症反應、病毒感染、腫瘤轉移、調控細胞凋亡中有重要作用。gC1qR進入細胞線粒體內蓄積，能導致線粒體功能障礙，促進凋亡；而gC1qR與CRT形成CRT/gC1qR複合體則可阻止gC1qR線粒體和核轉位，促進細胞增殖或遷移。通過構建表皮細胞氧化應激模型研究發現，黑素細胞膜表面CRT時間梯度依賴性上調，而細胞內部發生時間依賴性gC1qR表達上調及線粒體轉位；與黑素細胞不同的是，角質形成細胞中未見時間依賴性CRT膜外翻，且細胞內部gC1qR表達下調，且未發生顯著線粒體轉位。氧化應激激活內質網應激經典信號通路，PERK相關通路主要調控黑素細胞CRT膜聚集，且具有顯著的時間依賴性，而IREIα及ATF6相關通路激活與黑素細胞膜型CRT表達無關。體外與HLA分型一致患者PBMC構建共孵育模型，黑素細胞CRT膜聚集導致CD8+ T細胞增殖並促進IFN-γ產生，並促進DC細胞表面成熟標誌物CD86及HLA-DR表達。黑素細胞中的CRT與gC1qR均參與細胞的凋亡，發揮促凋亡的作用，其中CRT主要導致細胞早期凋亡，gC1qR可以導致線粒體內膜發生去極化、膜電位下降，並引起胞內ROS的蓄積；與黑素細胞相反，角質形成細胞中CRT/gC1qR複合體的形成阻止了CRT引起的細胞早凋、gC1qR誘導的線粒體膜電位下降及胞內ROS的蓄積。SRSF1、NCAPD2、HSP90AA1、SCARF1、TUBB2C可能與黑素細胞CRT競爭結合gC1qR從而誘導細胞凋亡。本項目研究證實，氧化應激誘導黑素細胞內部顯著的內質網和線粒體應激，導致CRT膜外聚集，gC1qR發生線粒體轉位，二者共同作用促進細胞凋亡；而角質形成細胞中，CRT與gC1qR形成CRT/gC1qR複合體，降低細胞損傷。揭示了黑素細胞與角質形成細胞中CRT、gC1qR不同表達模式的分子基礎，對闡明和理解氧化應激誘發白癜風的機制具有重要意義。