《CRISPR/Cas9介導的視網膜色素變性在體基因治療的研究》是依託北京大學，由徐曉健擔任負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：CRISPR/Cas9介導的視網膜色素變性在體基因治療的研究
- 項目負責人：徐曉健
- 依託單位：北京大學
- 項目類別：青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
視網膜色素變性(Retinitis pigmentosa, RP)是一種致盲性單基因遺傳疾病，給患者的生活質量造成了極大的影響，目前仍無有效的治療方法。CRISPR/Cas9作為一種高效的基因編輯工具可實現在體基因修飾。預試驗結果顯示AAV2/8(Y733F)介導的CRISPR/Cas9可在小鼠視網膜中對Rosa26和Pde6b基因進行在體編輯，並在離體小鼠視網膜中誘發Pde6b基因的定點突變。基於以上結果，我們提出CRISPR/Cas9可對RP進行在體基因治療。首先，我們將探討CRISPR/Cas9是否會對視網膜的結構和功能產生影響及最佳化在體編輯體系；其次，將以rd10小鼠為模型，探討AAV2/8(Y733F)介導的成對sgRNA與Cas9n在體矯正rd10小鼠Pde6b基因的突變。本研究為RP的基因治療提供新的思路，具有重要的理論和臨床套用價值。
結題摘要
視網膜色素變性（retinitis pigmentosa, RP）是一類不可治癒的遺傳性視網膜退行性疾病，給患者的生活質量造成了極大影響。基因治療作為一種極具前景的治療方式，給RP患者帶來了新的希望。CRISPR/Cas9 作為一種簡單高效的基因編輯工具，可在不區分遺傳方式的前提下對突變基因進行在體修飾。在本研究中，AAV2/8(Y733F)介導的Cas9過表達未對視網膜的形態結構產生顯著性影響。在此基礎上完成了在體編輯視網膜Pde6b基因，並在離體培養的視網膜中實現了Pde6b的定點突變。然而，成對sgRNA介導的在體定點矯正pde6b突變未能夠實現，需要進一步的探索。本研究為Cas9編輯體系在RP基因治療中的套用提供了一定的理論基礎。
