COCH基因突變致遲發進展性遺傳性聾的發病機制研究

《COCH基因突變致遲發進展性遺傳性聾的發病機制研究》是依託北京大學，由劉玉和擔任負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：COCH基因突變致遲發進展性遺傳性聾的發病機制研究
• 項目負責人：劉玉和
• 依託單位：北京大學
• 項目類別：面上項目

項目摘要

由COCH基因突變導致的遲發性遺傳性聾顳骨病理顯示內耳退行性變，而突變基因蛋白的錯摺疊是導致某些神經退行性疾病的重要原因，推測COCH基因突變蛋白的錯摺疊及代謝異常可能是內耳功能障礙的發病機制。本研究在已發現COCH基因突變的基礎上，擬採用構建突變位於不同結構域的COCH基因表達質粒轉染細胞系，以及構建與人致病突變相對應的鼠突變COCH基因病毒表達載體轉染鼠內耳，通過蛋白印跡、ELISA、質譜分析等方法檢測細胞培養液、細胞裂解液以及鼠內耳組織突變Cochlin蛋白各同工型的含量，同時監測耳蝸功能，探討COCH基因不同突變蛋白是否影響其在細胞外基質中的整合。進一步以膠原蛋白為靶位，採用等離子共振、光譜分析和免疫共沉澱等方法鑑定Cochlin蛋白的互作蛋白，探討Cochlin蛋白在內耳的作用，從而闡明COCH基因突變致遲發性聾的發病機制，為進一步探討遲發進展性遺傳性聾的藥物治療提供依據。

結題摘要

COCH基因突變是引起常染色體顯性遺傳非綜合徵性耳聾9型（DFNA9）的原因。患者表現為遲發進展性聾可伴有前庭功能障礙。本課題研究COCH基因不同突變位點的致病機制和臨床表型之間的關係。通過構建了位於不同結構域的COCH基因突變型表達載體，以及構建與人致病突變相對應的鼠突變COCH基因病毒表達載體轉染鼠內耳，通過蛋白質印跡、ELISA、質譜分析等方法檢測細胞培養液、培養細胞以及鼠內耳突變Cochlin蛋白各同工型的含量，同時耳蝸電圖監測耳蝸功能，探討Cochlin蛋白在耳蝸過表達或代謝異常是否會引起動物模型膜迷路積水。實驗發現突變型Cochlin蛋白LCCL小片段剪下異常和蛋白多聚體形成是導致DFNA9的重要原因。位於LCCL結構域的突變常引起小片段剪下異常和患者前庭功能障，位於vWFA結構域的突變更加容易形成多聚體，因為vWFA結構域與細胞外基質的形成密切相關，位於LCCL結構域和vWFA結構域之間的p.C162Y位點，既導致小片段剪下異常，又容易形成多聚體，兩個家系表現出了不同的表型。進一步闡明了COCH基因突變致遲發性聾的發病機制，為探討遲發性進展性聾的藥物治療提供依據。