《C5a促動脈粥樣硬化及其機制的實驗研究》是依託山東大學，由安貴鵬擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：C5a促動脈粥樣硬化及其機制的實驗研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：安貴鵬
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
補體是天然免疫系統的重要組成部分，在機體的抗感染免疫、免疫調節和炎性反應中發揮了重要作用。近年來，許多研究表明補體系統參與了動脈粥樣硬化（AS）病灶的發展過程，但其關鍵的效應分子-C5a在AS斑塊發展過程中的作用尚不明確。本研究擬採用高脂餵養的雄性ApoE-/-小鼠為模型，通過將腺病毒載體介導的C5a基因分別作用於斑塊發展的不同階段，明確C5a高表達對AS斑塊發展早期和晚期的影響；通過對血清炎性因子、斑塊內細胞組分和泡沫細胞生成進行分析，明確C5a促斑塊發展的具體機制；培育並高脂飼養C5aR-/-LDLR-/-和C5aR+/+LDLR-/-小鼠，通過分析C5a受體缺陷對AS斑塊發展的影響，進一步明確C5a在AS發展過程中的作用及機制。本研究對於進一步明確補體乃至於天然免疫系統在AS病灶發展過程中的作用具有重要的科學意義，並有可能為臨床提供新穎的、有效的治療手段。
結題摘要
本研究對補體過敏毒素-C5a在動脈粥樣硬化發生髮展過程中的作用進行了深入研究。我們通過套用不同劑量的C5a高表達腺病毒分別作用於高脂餵養4周或12周的雄性ApoE-/-小鼠，而後繼續高脂餵養4周。結果發現C5a高表達明顯地增加了早期斑塊的形成，而對發展中的晚期斑塊無明顯影響。斑塊組分的分析發現C5a高表達明顯增加了斑塊內的巨噬細胞浸潤，減少了膠原和平滑肌細胞的含量，從而增加了易損指數。為了明確其致病機制，我們分析了C5a對粘附因子和炎症因子表達的影響。結果發現C5a高表達明顯增加了斑塊內C5a、P-選擇素、ICAM-1和VCAM-1的表達，而對C5aR和E-選擇素的表達未產生明顯影響；攜帶C5a基因序列的腺病毒注入小鼠體內後，IL-6、TNFa、IFN-γ、MCP-1和IL-8的表達明顯增加，而IL-1β的水平無明顯差異。為了明確C5a促動脈粥樣硬化進展的機制，我們分析了C5a對泡沫細胞形成的影響。結果發現，C5a干預後，明顯的促進了泡沫細胞的形成。進一步分析提示C5a通過MAPK信號通路介導的CD36高表達促進了泡沫細胞形成，而對膽固醇流出未產生明顯影響。C5a主要通過與C5aR相互作用而發揮其病理生理功能，為了明確C5aR缺失對動脈粥樣硬化的影響，我們C5aR-/-小鼠與LDLR-/-小鼠雜交獲得C5aR-/- LDLR-/-及C5aR+/+LDLR-/-小鼠。8周齡的小鼠分別高脂餵養8周或16周后處死，結果發現C5aR基因缺陷明顯的限制了早期斑塊的形成和晚期斑塊的發展。斑塊組分的分析發現，C5aR基因缺陷減少了斑塊內的巨噬細胞浸潤，增加了膠原的含量。免疫組化研究發現C5aR基因缺陷減少了斑塊內P-選擇素、ICAM-1和VCAM-1的表達，導致了較低的IL-6,TNFa，IFN-γ、MCP-1和IL-8水平。綜上，本研究發現C5a通過促進泡沫細胞形成、粘附因子和炎性因子的表達，而發揮了促動脈粥樣硬化作用。
