《Aurora-A/PLK1雙靶點抑制劑抗腫瘤活性及機制研究》是依託電子科技大學,由師健友擔任醒目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：Aurora-A/PLK1雙靶點抑制劑抗腫瘤活性及機制研究
- 依託單位：電子科技大學
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：師健友
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
Aurora-A和Plk1這兩種激酶控制了細胞周期G2/M檢測點功能的關鍵環節，遭受DNA損傷的細胞由修復到重新進入有絲分裂的過程中，二者對中心體的募集和紡錘體的形成起著關鍵作用。抑制Aurora-A或PLK1均能夠阻止中心體成熟和雙紡錘體的形成。單獨對二者進行抑制均能使細胞的有絲分裂被阻滯，達到阻斷癌細胞複製的功能，然而對二者共同抑制能否增強對細胞有絲分裂的抑制作用還未見報導。為此，我們課題組開展了Aurora-A/PLK1雙靶點抑制劑的研究工作，以前期研究的吡唑[3,4-b]吡啶類Aurora-A抑制劑為先導化合物，藉助計算機輔助藥物分子設計方法發現了新穎的4-苯基硫代三唑酮類Aurora-A/PLK1雙靶點抑制劑。在此基礎上開展體外及體內活性和作用機制的研究，在發現結構新穎的Aurora-A/PLK1抑制劑的同時，初步闡明了同時抑制這兩個靶點能夠增強抗癌活性的作用機制。
結題摘要
在青年科學基金的資助下，我們開展了一系列針對Aurora-A和PLK-1雙靶點進行藥物發現的研究。首先，我們設計併合成多個可抑制Aurora-A和PLK-1雙靶點活性的化合物，進而通過計算機輔助設計進行構象分析，建立了基於蛋白Aurora-A和PLK-1與小分子抑制劑複合物晶體結構的虛擬篩選的方法體系；在化合物合成方面，完成了硫代三唑酮、6-氨基-1-萘甲醯胺和苯並咪唑酮衍生物的設計和合成，並嘗試合成了其他多種多樣性骨架的化合物庫；對已合成的化合物在分子水平以及在多細胞株水平進行了針對Aurora-A和PLK-1雙靶點體外活性測試，篩選出具有較好活性的候選化合物。進而，將該化合物在體外通過western blot、流式細胞術、細胞克隆等一系列實驗開展了機理研究，證明了該候選物作為雙靶點抑制劑的作用。進而我們進行了體內動物實驗，主要評估了藥物在體內的代謝水平，並在裸鼠模型上，考察了植入結腸癌細胞HCT116細胞後經過藥物治療的瘤重和體重等指標，並對腫瘤組織進行了免疫組化分析。最終，我們將最佳化後的藥物通過基因晶片對相關基因庫進行篩選，並對該化合物可能相關基因及通路做出了分析和推斷。 結果顯示：最佳化後的化合物體內外抗結腸癌活性顯著，與單靶點抑制劑相比，該雙靶點抑制劑能顯著提升抗腫瘤效果並且減少毒副作用。本項目的研究，為後續雙靶點抑制劑小分子藥物研發提供了新方法與新思路，另外，針對該類分子深入的藥效學實驗研究對對Aurora-A和PLK-1雙靶點在動物體內的新功能探討提供更多的理論依據和實驗基礎。
