《Afamin對分化型甲狀腺癌失分化與碘-131攝取功能的影響及機制》是依託上海交通大學，由羅全勇擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：Afamin對分化型甲狀腺癌失分化與碘-131攝取功能的影響及機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：羅全勇
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
分化型甲狀腺癌（DTC）失分化導致碘-131攝取功能喪失是目前臨床面臨的主要難題。本課題組通過蛋白質組學方法篩選與驗證，首次發現afamin蛋白低表達可能與DTC失分化有關。為進一步揭示afamin對DTC失分化和碘-131攝取的影響及機制，本研究以pEGFP-N1質粒為載體，將afamin基因轉染至乳頭狀甲狀腺癌細胞K1和由DTC失分化而來的未分化甲狀腺細胞8505c中，以上調afamin的表達（以空質粒轉染細胞和未轉染細胞為對照）；然後檢測細胞MAPK信號通路相關蛋白表達的變化，並在基因水平和蛋白水平檢測NIS、TSHR、TPO、Tg和甲狀腺轉錄因子及GLUT1表達的變化，最後在體外細胞水平和荷瘤裸鼠模型上檢測K1和8505c細胞對碘-131和18FDG攝取的變化，以闡明afamin對DTC失分化的影響及機制，並探索發現提高碘-131攝取功能的新靶點。該研究具有重要科學價值和現實意義。
結題摘要
分化型甲狀腺癌（Differentiated thyroid cancer，DTC）是內分泌系統最常見的惡性腫瘤，且其發病率在全球範圍內逐漸升高。DTC轉移灶對18F-FDG的攝取情況對DTC患者的預後具有重要的價值，即：轉移灶具有高18F-FDG攝取預示相對不佳的預後。文獻報導Afamin是某些腫瘤的標誌物，但其在甲狀腺癌細胞及分子水平的功能尚未被闡明。本研究使用人乳頭狀甲狀腺癌（PTC）細胞株K1，未分化型甲狀腺癌細胞株8505c及相應荷瘤裸鼠模型作為研究對象，對Afamin在甲狀腺癌碘糖代謝中的作用做了系列研究。我們使用慢病毒轉染技術成功構建了穩定表達Afamin的細胞株K1+AFM及8505c+AFM， 用實時螢光定量PCR及western blot來檢測細胞基因表達變化。並用小動物PET/CT顯像用來檢測裸鼠皮下移植瘤對18F-FDG的攝取。本研究結果顯示Afamin可能通過激活AKT/mTOR通路上調葡萄糖代謝相關蛋白（GAPDH, GLUT1, HK2）的表達，從而提高PTC細胞的葡萄糖代謝。體外18F-FDG攝取實驗及體內小動物顯像均表明PTC在穩定表達Afamin後，其葡萄糖代謝水平升高。另外，我們還發現穩定表達Afamin之後，PTC細胞中DNA損傷修復蛋白PARP1的表達水平顯著升高，提示Afamin可能通過提高PARP1的表達增加分化型甲狀腺癌細胞對碘-131的輻射耐受。本研究首次在細胞及分子水平研究了Afamin對甲狀腺癌的影響，研究結果可為分化型甲狀腺癌特別是難治性分化型甲狀腺癌的診治提供了新的思路；同時本研究結果首次報導Afamin對腫瘤細胞葡萄糖代謝產生的影響，闡明了該基因在腫瘤中可能的功能，為將來後續的研究提供了新的思路。此外，我們發現二甲雙胍在體外和體內實驗中均能通過下調HK2和GLUT1的表達水平從而降低DTC的糖代謝水平並抑制DTC細胞的增殖活性，該發現為碘難治性甲狀腺癌的治療提供了新的策略。
