《APC-Cdh1通過泛素化降解NEDD4L調控血管新生的機制研究》是依託西安交通大學，由劉甲擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：APC-Cdh1通過泛素化降解NEDD4L調控血管新生的機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：劉甲
- 依託單位：西安交通大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
血管新生與腫瘤、糖尿病和動脈粥樣硬化等多種疾病密切相關。E3泛素連線酶NEDD4L通過其底物影響血管新生，但NEDD4L上游因子調控其體內穩態的相關分子機制尚不清楚。預實驗發現：E3泛素連線酶APC/C的共激活子Cdh1與NEDD4L存在相互作用，沉默Cdh1可上調NEDD4L的蛋白表達並促進內皮細胞增殖。我們推測：APC-Cdh1複合體通過泛素化修飾NEDD4L參與血管新生的調控。本研究擬（1）採用RNA干擾、免疫共沉澱、基因定點突變等方法，探討APC-Cdh1泛素化修飾NEDD4L的分子調控機制；（2）使用流式細胞儀和內皮細胞成管等技術，分析Cdh1-NEDD4L泛素化修飾系統對內皮細胞增殖、遷移及血管新生的調控作用；（3）利用Cdh1內皮特異性敲除小鼠研究Cdh1通過NEDD4L對血管新生的影響。本研究將闡明NEDD4L泛素化修飾的分子機制並為血管新生相關疾病的防治策略提供新的思路。
結題摘要
泛素-蛋白酶體系統因其種類繁雜、底物多樣，在各種生理學和病理生理學過程中起著極為重要的作用。其中，E3泛素連線酶募集E2和特異性的底物形成蛋白複合物, 在整個泛素化的過程中起著最關鍵的作用，它的失調與多種疾病密切相關，包括：動脈粥樣硬化、二型糖尿病、高血壓、動脈瘤和多種癌症。我們的研究以E3泛素連線酶為核心，希望為動脈粥樣硬化及糖尿病尋找到新的藥物靶點並提供相應的實驗論據。我們發現：1. 血小板內皮細胞黏附因子PECAM-1在湍流引起的內皮細胞炎症中起重要作用。然而，調控PECAM-1蛋白穩態的分子機制仍不清楚。本研究證明了PECAM-1是E3泛素連線酶APC/Cdh1的一種新底物。此外，我們發現湍流能夠降低Cdh1的蛋白水平，從而減弱PECAM-1的泛素化，導致PECAM-1的蛋白水平上調，引起內皮細胞炎症。因此，我們的研究揭示了血流剪下力通過APC/Cdh1依賴的泛素化修飾來調控PECAM-1降解，從而調控內皮穩態這一新機制，為動脈粥樣硬化等代謝性心血管疾病的治療提供了新的理論基礎和思路。2. 神經前體細胞表達發育下調蛋白4（NEDD4）在調控胰島素和自噬等多種信號轉導途徑中發揮著重要作用。然而，NEDD4基因轉錄調控的分子機制尚未完全闡明。我們發現過氧化物酶體增殖物激活受體γ（PPARγ）是NEDD4基因的上游轉錄因子。並且PPARγ的激動劑可通過NEDD4增加葡萄糖攝取及誘導自噬升高。我們的結果表明PPARγ通過NEDD4介導的自噬機制在葡萄糖代謝和蛋白質穩態的調節中起重要作用，NEDD4可能是治療二型糖尿病的一個新的藥物靶點。項目資助期間，課題組共發表SCI論文5篇，並培養了3名博士研究生和5名碩士研究生，及1名博士後出站和2名青年教師。課題組順利完成了所有預定的研究計畫。
