AFLP的全稱是擴增片段長度多態性(Amplified Fragment Length Polymorphism),此技術是建立在基因組限制性片段基礎上的PCR 擴增。
基本介紹
- 中文名:擴增片段長度多態性
- 外文名:Amplified Fragment Length Polymorphism
- 簡寫:AFLP
- 基礎:PCR 擴增
由於不同物種的基因組DNA 大小不同,基因組DNA 經限制性內切酶酶切後,產生分子量大小不同的限制性片段。使用特定的雙連結頭與酶切DNA 片段連線作為擴增反應的模板,用含有選擇性鹼基的引物對摸板DNA 進行擴增,選擇性鹼基的種類、數目和順序決定了擴增片段的特殊性,只有那些限制性位點側翼的核苷酸與引物的選擇性鹼基相匹配的限制性片段才可被擴增。擴增產物經放射性同位素標記、聚丙烯醯胺凝膠電泳分離,然後根據凝膠上DNA 指紋的有無來檢出多態性。
AFLP的缺點:
此技術受到專利保護,套用受到限制,試劑盒價格昂貴。
另外,操作中通常要利用同位素標記,對樣品DNA質量要求嚴格。